产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
产品简介
SspDI (KasI)属于常规限制酶系列，可识别G^GCGCC序列。不同于FuniCut®系列快速内切酶，SspDI (KasI)需要较长时间酶切以实现DNA底物的完全切割，但该酶仍使用FuniCut®系列限制酶的通用反应缓冲液FuniCut® Buffer，可实现双酶切。
产品信息
|
货号 |
15212ES72 |
|
规格 |
250 U |
|
识别位置 |
5'-G↓GCGCC-3' 3'-CCGCG↑G-5' |
|
酶活 |
10 U/μL |
|
反应条件 |
1×FuniCut® Buffer；37℃孵育 |
|
失活条件 |
80℃温育20 min |
|
酶活定义 |
单位活性单位(U)是指在 50 μL反应体系中，37℃ 1 h内可以完全酶切1 µg的pBR322所需的酶量 |
|
同裂酶 |
KasI, DinI, EgeI, EheI, Mly113I, NarI, PluTI, SfoI |
组分信息
|
组分编号 |
组分名称 |
15212ES72 |
|
15212-A |
SspDI (KasI) (10 U/μL) |
25 μL |
|
15212-B |
10×FuniCut® Buffer |
1 mL |
|
15212-C |
10×FuniCut® Color Buffer |
1 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
1. 体系配制
1）建议冰上操作，按如下加样顺序配制反应体系
|
组分 |
体积 |
|
ddH2O |
up to 50 μL |
|
10×FuniCut® Buffer |
5 μL |
|
底物DNA* |
1 μg |
|
SspDI (KasI) (10 U/μL) |
1 μL |
|
Total |
50 μL |
*DNA 底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响SspDI (KasI) (10 U/μL)酶活性
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37℃孵育 1~16 h。
4) 80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
2. 不同DNA中的识别位点数
|
λDNA |
ΦX174 |
pBR322 |
pUC57 |
pUC18/19 |
SV40 |
M13mp18/19 |
Adeno2 |
|
1 |
2 |
4 |
1 |
1 |
0 |
1 |
20 |
3. 甲基化修饰影响
|
Dam |
Dcm |
CpG |
EcoKI |
EcoBI |
|
无影响 |
无影响 |
剪切受阻 |
无影响 |
无影响 |
4. 不同反应缓冲液中的活性*
|
反应缓冲液 |
FuniCut® Buffer |
Thermo Scientific FastDigest Buffer |
NEB CutSmart® Buffer |
Takara QuickCut™ Buffer |
|
活性 |
100% |
<12.5% |
100% |
<25% |
注意事项
1. 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性。
2. 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂 ( 例如甘油、盐 ) 与底物溶液中的污染物 ( 例如盐、EDTA 或乙醇等 ) 相同，反应体积越小，酶切反应抑制效应越强。
3. 本产品仅作科研用途。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20241104
推荐产品应用
