复制型腺相关病毒血清型2(rcAAV2)检测试剂盒是用于定量分析检测各种使用AAV2血清型的重组腺相关病毒载体进行基因治疗、肿瘤治疗及疫苗研发等产品中可能发生的复制型腺相关病毒(ReplicationCompetentAAV,rcAAV)的潜在风险。本试剂盒基于荧光探针定量PCR原理，采用qPCR方法分别检测rAAV末端重复序列(ITR)（即参考基因Reference）和rcAAV的连接序列（即靶基因Target），实现对rAAV和rcAAV的同时定量检测。且配套同时含有参考基因Reference和靶基因Target的DNA定量参考品(rcAAV2Reference&TargetDNAControl)。使用本试剂盒前需确认待测样品同时满足下述条件：

1.待测样本中腺相关病毒的血清型为AAV2；

2.待测样本的重组腺相关病毒载体rAAV的ITR序列需与下述rAAV2的ITR序列匹配：>rAAV-2/N的ITRTTGGCCACTCCCTCTCTGCGCGCTCGCTCGCTCACTGAGGCCGGGCGACCAAAGGTCGCCCGACGCCCGGGCTTTGCCCGGGCGGCCTCAGTGAGCGAGCGAGCGCGCAGAGAGGGAGTGGCCAACTCCATCACTAGGGGTTCCT

1. 抗干扰性：针对复杂基质，样本加标回收率至少能达到70-130%；
2. 灵敏度高：定量下限(LLOQ)为2copies/μL，检测下限(LLOD)为0.125copies/μL；
3. 精密度高：批内重复性高CV＜10%，批间差异小即中间精密度CV＜15%；
4. 专属性强：特异性检测目的基因序列，不受其他外源基因组DNA干扰；
5. 防干扰强：引入内部质控(IC)，可排除样本干扰、反应配制异常等，避免假阴性。
6. 验证完善：参考ICH Q2（R2）分析方法验证指导原则，可提供完善的验证报告。

1. 检测范围

Target线性范围在2×10¹~2×10⁶copies/μL，R²=1，扩增效率为99.43%，各浓度检测值CV<15%；

Reference线性范围在2×10¹~2×10⁶copies/μL，R²=1，扩增效率为101.22%，各浓度检测值CV<15%。

                                                       图1. Target标曲线性图

                                                            图2. 扩增曲线性图谱

                                                        图3. Reference标曲线性图

                                                               图4. 扩增曲线性图谱

1. 所有组分均干冰运输，-25~-15℃保存，有效期 2 年。其中，41327-A、41327-B1 和 41327-B2 均需避光保存。

2. 收到货后，请检查共 5 个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。