推荐应用
核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶,有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键,产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。
应用场景:
- 单细胞凝胶电泳;
- NGS建库中DNA损伤修复;
- 酶法合成DNA中释放DNA链;
- 碱洗脱;
- 搭配UDG(Cat#10303ES)进行含U片段的克隆等。
- 高纯度,无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留;
- 失活条件75“C孵育10min。
- 受损碱基切除效果与进口品牌一致
分别使用翌圣与进口品牌N*的Endonuclease Ⅷ催化20 pmol寡聚核苷酸,20 µL反应体系中加入5~40 U的Endonuclease Ⅷ 和相同酶活的UDG(Cat#10303ES),37℃孵育1 h。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,翌圣Endonuclease Ⅷ与进口品牌N*的碱基切除效果一致。

图1. 受损碱基切除效果对比
- 无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留
将10 U Endonuclease VIII分别与相应的底物DNA/RNA在37℃孵育4 h,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,Endonuclease VIII 无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。

图2. 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留检测结果
-25~-15℃保存,有效期1年。
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