产品简介

 

Lambda核酸外切酶来源于lambda噬菌体，作用于双链DNA，沿5'→3' 方向逐步切去5' 单核苷酸。最适底物是5' 磷酸化的双链DNA，也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化双链DNA底物。其中，降解非磷酸化双链DNA，单链DNA底物的效率只有磷酸化双链DNA的5%，1%。另外，该酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。

 

产品信息

 

货号	14527ES80 / 14527ES90
规格	1,000 U / 5,000 U
酶活定义	1单位活性(U)定义为：在37℃下，1×Lambda exonuclease反应缓冲体系下，30 min内从5' 磷酸化的双链DNA中水解产生10 nmol 酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
酶储存液	25 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 8 @ 25°C
浓度	5 U/µL
失活条件	75℃, 10 min

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	14527ES80	14527ES90
14527-A	Lambda exonuclease (5 U/μL) Lambda核酸外切酶	200 μL	1,000 μL
14527-B	10×Lambda exonuclease Buffer	1 mL	5 mL

 

产品应用

 

1. 从5' 端高效降解平末端或带缺口的双链DNA，生成单链DNA

2. 优选底物为5' -磷酸化的双链DNA

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

 

1. 酶切反应

按照下表配置反应体系：

组分	体积
一条链或2条链为5' 磷酸化修饰的双链DNA*	1-5 μg
10×Lambda exonuclease Buffer	5 μL
Lambda exonuclease (5 U/μL) Lambda核酸外切酶	1 μL
H2O	Up to 50 μL

*若只有1条链为5’磷酸化修饰的线性双链DNA，则水解产物主要为单链DNA，可以用来制备单链DNA。若2条链都是5’磷酸化修饰的线性双链DNA，则水解产物主要为单核苷酸，即DNA完全水解。

2. 37°C反应30 min。

3. 75°C加热10 min，使酶失活。

4. 电泳检测DNA消化程度。

 

注意事项

 

1. 若底物为只有1条链为5' 磷酸化修饰的线性双链DNA，则水解产物主要为单链DNA，可以用来制备单链DNA；若底物为两条链都是5' 磷酸化修饰的线性双链DNA，则水解产物主要为单核苷酸，即DNA完全水解。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅用作科研用途！

 

 

Ver.CN20250106