核酸外切酶 I (Exonuclease I)来源于重组表达的E.coli菌株Exo I基因,该酶具有从3-5“方向水解单链DNA的外切酶活性,能够逐步释放脱氧核糖核酸5“单磷酸,并留下完整的5“端二核苷酸。本产品主要应用于PCR扩增后降解消化引物,对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3OH未端DNA链无活性。

应用场景：

• 常用于在Sanger测序或SNP分析之前去除PCR反应中的单链引物；
• 去除巢式PCR中的单链引物；
• PCR产物酶法纯化；
• 从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA等。

• Exonuclease I是一种对变性或单链脱氧核糖核酸具有高度选择性的核酸外切酶;
• Exonuclease I对双链DNA或RNA无活性，因此不会降解目标产物dsDNA。

• 单链DNA消化能力与品牌N*一致

20 μL反应体系中加入终浓度为15 pmol/μL的单链DNA底物，分别使用不同投入量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）的翌圣及进口品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min，80℃热失活15 min，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA降解情况。结果显示翌圣的Exonuclease I消化单链DNA的能力与品牌N*一致。

图1. 翌圣及进口品牌N*对单链DNA的消化能力

• 无核酸内切酶残留

将500 ng底物DNA与100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无核酸内切酶残留。

图2. 核酸内切酶残留检测

• 无RNase残留

将底物RNA与20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测RNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无RNase残留。

图3. RNase残留检测

-25~-15℃保存，有效期2年。