牛痘病毒加帽酶ELISA检测试剂盒 Vaccinia Capping Enzyme ELISA Kit（36709ES）

真核生物中mRNA经转录后修饰在5'端形成一个特殊结构，即帽子结构，该结构对mRNA的稳定、转运与翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶，其由D1和D12两个亚基组成，兼具RNA三磷酸酯酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性，可将7-甲基鸟嘌呤帽结构（m7Gppp）连接到RNA的5'末端（m7Gppp5'N）。牛痘病毒加帽酶，在合适浓度的加帽缓冲液（Capping buffer），鸟苷三磷酸（GTP），S-腺苷甲硫氨酸（SAM）等存在条件下，能够在一个小时之内对RNA进行加帽，并且保证正确的方向。本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理进行牛痘病毒加帽酶残留量检测，将牛痘病毒加帽酶标准品和待测样本加入预包被抗牛痘病毒加帽酶抗体的酶标板（36709-A），然后加入稀释后的生物素标记的牛痘病毒加帽酶检测抗体（36709-C），最后加入Streptavidin-HRP（SA-HRP）（36709-D），形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+ SA‐HRP 复合物，洗板后加入TMB显色液（36709-H）显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液（36709-I）的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的牛痘病毒加帽酶的量呈正相关。

1. 符合法规：按照Chp、USP、ICHQ2（R2）等要求进行全面验证；
2. 保障品质：包被和检测抗体、标准品等原材料全自主研发，可溯源；
3. 配合审计：生产工艺稳定，批间差可控，有完善的审计文件；
4. 灵敏度高：定量下限(LLOQ)可达0.125 ng/mL，检测下限(LLOD)低至0.065 ng/mL；
5. 精密度高：批内重复性高CV＜10%，批间差异小即中间精密度CV＜15%；
6. 准确性高：样本加标回收率均在70%~130%范围内；
7. 专属性强：向样本中添加不同类型的干扰物，牛痘病毒加帽酶测试值未见显著性差异；
8. 稳定性好：试剂盒在37℃条件下可稳定放置7天，性能不受影响。

1. 检测范围

试剂盒线性范围为0.125～8 ng/mL，R²=1.000，各浓度检测值CV≤10%。标准曲线结果如下：

2. 准确度

向3种不同基质样本中等比例添加高中低三个浓度Vaccinia Capping Enzyme标准品，同时将高值添加的样本做倍比稀释。对倍比稀释样本，以及不同加标浓度样本，未加标样本中的Vaccinia Capping Enzyme进行检测，线性回收率和加标回收率在80%-120%之间。结果如下：

加标回收率=实测值/（加标准品×50%+加标本值×50%）

2~8℃保存，未拆封有效期1年。

*收到货后，请检查各组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。