无机焦磷酸酶（Inorganic Pyrophosphatase，PPase）可催化一分子焦磷酸盐转化为两分子磷酸盐离子。在核酸扩增实验中，PPase可以水解随着反应生成的无机焦磷酸盐，这是一个高放能的反应，可使反应平衡向产物生成端移动，从而避免对反应体系的抑制。

在mRNA疫苗制品的生产过程中，加入PPase可以提高mRNA的产量。但对于以mRNA为终产物的产品来说，加入的PPase属于外源物质，需要在工艺纯化过程中被去除，因此需要对PPase的残留量进行检测以评估纯化工艺对于蛋白残留的去除效果以及确认mRNA疫苗制品中的PPase残留是否被纯化至一定的可接受范围。

本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理进行PPase残留量检测，将PPase标准品和待测样本加入预包被抗PPase抗体的酶标板（36706-A），然后加入稀释后的生物素标记的检测抗体（36706-C），最后加入Streptavidin-HRP（SA-HRP）（36706-D），形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+ SA‐HRP 复合物，洗板后加入TMB显色液（36706-H）显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液（36706-I）的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的PPase的量呈正相关。

 

产品信息

货号	36706ES48 / 36706ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	0-16 ng/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	3.5小时
灵敏度	0.16 ng/mL
回收率	75 - 125%
板内差	<10%
板间差	<15%

 

实验数据

1. 标曲数据

典型的参考标准曲线如下（以下标准曲线图仅供参考，应以同次实验标准品所绘标准曲线计算样本含量）：

2. 检测流程

图2：实验步骤流程简图