产品简介

 

Endo H（糖苷内切酶 H）是一种重组糖苷酶，克隆自褶皱链霉菌（Streptomyces plicatus），能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割，去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。翌圣Endo H糖苷内切酶H在酵母中重组表达，储存缓冲液中无甘油有助于在HPLC和质谱分析中获得最佳结果。本产品带his标签，常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

    另外，我司还提供其他类型的糖苷酶，如Endo S糖苷内切酶S（Cat#20413ES），Fast PNGase F, N-糖苷酶 F（快速版）（Cat#20406ES, 可以在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化），储存缓冲液中含甘油的PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)（Cat#20407ES）、储存缓冲液中无甘油的PNGase F（Glycerol-free）, N-糖苷酶 F (无甘油，100000 U/mL)（Cat#20405ES）。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	20414ES92	20414ES97
A	Endo H	10000 U	50000 U
B1	Buffer 1（10×）	100 μL	500 μL
B2	Buffer 2（10×）	200 μL	1000 μL

 

产品性质

 

中文别名（Chinese synonym）	糖苷内切酶 H
英文别名（English synonym）	Endo H
来源（Source）	酵母
分子量*（Molecular weight）	理论值29 kDa
比活性（Specific activity）	1000000 U/mL
储存缓冲液（Storage Buffer）	20 mM Tris，50 mM NaCl，5 mM EDTA  PH7.5
酶活定义（Unit Definition）	1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

*由于毕赤酵母真核表达的影响，SDS-PAGE（不煮沸）显示目的蛋白的分子量约60 kDa，SDS-PAGE（煮沸）显示目的蛋白的分子量约29 kDa。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

 

1. 变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白（1-20 μg），至终体积10 μL；

2）100℃温度下煮沸10 min使其变性，冰上冷却，离心10秒；

3）加入2 μL的Buffer 2，8μL去离子水，总反应体积20 μL；

4）加入1-2 μL的Endo H，轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

5）75℃下热失活10分钟。

2. 非变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白（1-20 μg）至最终体积为 20 μL。

2）加入 2~5 μL 的 EndoH, 轻轻混匀。

3）37°C孵育 4-24 h。

注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加Endo H的量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20240813