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Proteinase K蛋白酶K

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COA

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产品简介

 

Proteinase K（蛋白酶 K）是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，其相对分子量约为29 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。Proteinase K 应用广泛，可用于制备脉冲电泳的染色体 DNA，蛋白质印迹以及去除 DNA 和 RNA制备中的核酸酶等实验，而变性剂如 SDS（1%）可提高其活性，常用工作浓度为 50-100 µg/mL，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

 

组分性质

 

1）本品来源于基因重组酵母菌株；

2）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg 蛋白；

3）不含 RNase 和 DNase；

4）在尿素和 SDS 中活性稳定存在；

5）在较广的 pH 范围内（pH 4.0 – 12.0）均有活性，最佳 pH 范围为 pH 7.5 - 9.0；

6）反应条件：反应缓冲液中在反应温度 37℃ - 70℃温育 1 h。

7）活力单位定义：在 37℃，pH 7.5 的条件下，每分钟释放 1 µM 酪氨酸所需要的 Proteinase K 量定义为 1 个活性单位；

8）失活方法：反应体系中加入 PMSF 或 DFP 抑制剂即可失活，65℃温育 10-15 min 可部分失活。

 

储存条件

 

冰袋运输。2~8℃干燥保存，有效期 3 年。更长期保存，可置于-25~-15℃冷冻保存。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）启用后如需反复使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。

3）本产品仅作科研用途！

 

使用说明

 

1. 20-40 mg/mL Proteinase K 储存液的配制

1）将干粉溶解于稀释缓冲液中，配制成 40-80 mg/mL 原液；

【注】：稀释缓冲液配方：20 mM Tris-HCl (pH7.4), 1 mM CaCl2。

2）使用低蛋白吸附的 0.22 µm 滤器过滤除菌；

3）加入等体积无菌甘油，配制成含 50 %甘油的 Proteinase K 储存液。

【注】：Proteinase K 储存液 4℃保存 1 年。若需反复使用，需分装保存。

2.按照核酸提取说明书添加指定量 Proteinase K 储存液即可。

 

Ver.CN20240416

 

400-6111-883