N-糖基化发生在蛋白质天冬酰胺残基的侧链酰胺氮上，其共识序列为Asn-X-Ser/Thr（X为除脯氨酸外的任意氨基酸）。N-糖链的合成起始于内质网，先以脂质载体多萜醇焦磷酸的形式装配寡糖前体，随后整体转移至新生多肽链上，再经内质网和高尔基体中一系列糖基转移酶与糖苷酶的修剪和加工，最终形成高甘露糖型、杂合型和双天线复合型N-糖链结构。对N-连接糖，去糖基化常被使用的酶是PNGase F (N-糖苷酶F)、Endo H (糖苷内切酶H)、Endo S(糖苷内切酶S )等，详见专题： 去糖基化酶助力糖蛋白和抗体糖型分析（去N-糖基化版）

O-糖基化则发生在丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧上，不同于N-糖基化，O-糖链没有固定的共识序列，其合成不经历前体整体转移过程，而是由糖基转移酶逐个将单糖依次添加至蛋白质上，常见以N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）为起始糖的黏蛋白型O-糖链为代表。对O-连接糖，去糖基化常被使用的酶是O-Glycosidase (O-糖苷酶)，但核心结构以外的单糖必须通过一系列外切糖苷酶依次切割，直到仅保留Core 1或Core 3二糖核心，O-糖苷酶才能够完整的从Ser或Thr残基上释放二糖核心。

糖苷酶，又称内切-α-N-乙酰氨基半乳糖苷酶，能够将糖蛋白中Ser或Thr残基的羟基连接的

Core 1（Gal-β(1-3)-GalNAc-）及Core 3（GlcNAc-β(1-3)-GalNAc-）O-连双糖释放下来。

该酶对α-GalNAc结合是特异性的，但对于Ser或Thr残基没有明显的偏好，同时糖蛋白的变性与否也不显著影响O-去糖基化的效率。但核心结构的任何修饰都可以阻断O-糖苷酶的作用，最常见的修饰是核心结构的单、二或三唾液酸化。除此以外，核心结构还可能被岩藻糖、N-乙酰葡糖胺或N-乙酰半乳糖胺残基进一步取代修饰，核心结构以外的单糖必须通过一系列外切糖苷酶依次切割，直到仅保留Core 1或Core 3二糖核心，O-糖苷酶才能够完整的从Ser或Thr残基上释放二糖核心。通常O-糖苷酶的使用都需要配合唾液酸酶。

我司目前可提供大肠杆菌重组表达的O-Glycosidase O-糖苷酶（Cat# 21401ES）

唾液酸酶，又称神经氨酸苷酶，可同时作用于N-乙酰神经氨酸（Neu5Ac）和N-羟乙酰神经氨酸（Neu5Gc）。α2-3,6,8 Neuraminidase（α2-3,6,8唾液酸酶）可催化水解糖蛋白和寡聚糖上通过α2-3、α2-6、α2-8键连接的唾液酸，其水解α2-3键的速度要大于α2-6和α2-8键，水解α2-6和α2-8键的速度近似。α2-3,6,8,9 Neuraminidase（α2-3,6,8,9唾液酸酶）可催化水解糖蛋白和寡聚糖上通过α2-3、α2-6、α2-8、α2-9键连接的唾液酸，其水解α2-3和α2-6键的速度要大于α2-8和α2-9键，在0.5%~1%的去污剂的体系里，该酶活性基本不受影响。

我司目前可提供大肠杆菌重组表达的α2-3,6,8 Neuraminidase α2-3,6,8唾液酸酶（Cat# 21402ES）、α2-3,6,8,9 Neuraminidase α2-3,6,8,9唾液酸酶（Cat# 21403ES）

β1-4半乳糖苷酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，可催化水解寡糖末端的非还原的半乳糖残基。

我司目前可提供大肠杆菌重组表达的β1-4 Galactosidase β1-4半乳糖苷酶（Cat# 21404ES）

β-N-乙酰氨基己糖苷酶是一类重要的糖基化研究的工具酶，可催化水解寡糖非还原末端 β(1-3,4,6)-连接的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和β(1-4)-连接的N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)残基。

我司目前可提供大肠杆菌重组表达的β-N-Acetylhexosaminidaseβ-N-乙酰氨基己糖苷酶（Cat# 21405ES）

●5）α-N-乙酰半乳糖胺酶

α-N-乙酰半乳糖胺酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，可催化水解糖蛋白上寡糖和Nα-连接糖链上的D-N-乙酰氨基半乳糖残基，在白蛋白（Albumin）存在的情况下，酶的活性会增强。

我司目前可提供大肠杆菌重组表达的α-N-Acetylgalactosaminidase α-N-乙酰半乳糖胺酶（Cat# 21406ES）