推荐应用
E.coli Poly (A)聚合酶,也称PolyA加尾酶,能以不依赖于模板的方式催化由ATP转化成的AMP添加到单链RNA的3'未端,形成Poly(A)尾。E.coli Poly(A)聚合酶能以多种单链RNA作为寡核苷酸不推荐作为该反应的底物。E.coli Poly(A) Polymerase催化的Poly(A)加尾反应只能使用ATP,而不能使dATP。使用CTP和UTP时,其掀入量不足使用ATP的5%;使用GTP时,完全不能添加到RNA的3'未端。
基于Ploy (A)聚合酶的RNA加尾已应用于微生物单细胞测序、mRNA体外合成、miRNA表达分析等场景。
- 无核酸酶及RNase酶残留；
- 加尾效率高。
- 应用于miRNA检测，灵敏度更高
图1. 以10ng、1000ng人源总miRNA为模板，使用翌圣E.coli poly(A) Polymerase（Cat#14801）进行加尾法反转录，获得的cDNA进行qPCR检测。结果显示翌圣E.coli poly(A) Polymerase应用于miRNA反转录，灵敏度优于品牌A。
- 无核酸外切酶残留
图2. 核酸外切酶残留检测。将15 U poly(A) Polymerase和0.5 μg λDNA-HindⅢ digest于37℃孵育2小时，结果显示翌圣E.coli poly(A) Polymerase（Cat#14801）核酸外切酶残留水平与进口品牌一致。
-25~-15℃保存，有效期2年。
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