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CpG-Specific Carboxymethyltransferase (CxMTase, 30 μM)
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产品介绍

CpG-Specific Carboxymethyltransferase(CxMTase)来源于穿透支原体(Mycoplasma penetrans)的甲基转移酶基因M.MpeI。本品经蛋白改造及重组表达而来,既可识别天然的S-adenosyl-l-methionine(SAM)底物,还可特异性识别人工改造的底物carboxy-S-adenosyl-l-methionine(CxSAM),可将胞嘧啶C修饰为5mC或5cxmC,抵御域胞嘧啶脱氨酶(APOBEC3A)的脱氨作用。可联合APOBEC3A使用,实现直接甲基化测序(DM-seq)。

产品特色
  • 首家DNA羧甲基转移酶(CxMTase)商业化产品供应商;
  • 可将胞嘧啶C修饰为5mC或5cxmC(抵御域胞嘧啶脱氨酶-APOBEC3A)的脱氨作用;
  • 蛋白纯度≥95%;
  • 无核酸外切酶、切口酶残留。
应用案例

低投入量即可高效完成DNA甲基化

检测原理:DNA模板含有HpaII酶切位点,该位点受CpG甲基化影响,甲基化位点剪切会阻断,CxMTase处理后的模板经HpaII酶切即可判断模板是否被甲基化修饰(未修饰模板被切割,甲基化模板不切割)。

检测方法:在含有1×CxMTase Reaction Buffer的反应体系中,梯度投入CxMTase(0.078-10 pmol),以SAM为底物,对10 pmol模板DNA(dsDNA)进行甲基化修饰,反应产物经HpaII酶切处理,琼脂糖凝胶电泳检测切割产物。

检测结果:在CxMTase投入量为0.31 pmol时,模板DNA未发生切割,酶切完全阻断,表明模板已被完全甲基化修饰。

图1. CxMTase甲基化效率检测 C1:DNA模板+HpaII;C2:DNA模板+水

存储条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

FAQ

Q:14555ES 提供的buffer里面是SAM或CxSAM吗?使用浓度是怎样的?

A:不包含SAM和CxSAM,需要单独添加。

COA
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