SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）标签蛋白，并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比，由于其识别序列长，所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性，且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力，例如温度（4-30℃）、pH（5.5-9.5）等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签，便于使用亲和层析的方法，去除SUMO蛋白酶，纯化目的蛋白。

 

产品组分

编号	组分名称	产品货号/规格
		20410ES60 （100 U）	20410ES70 （500 U）	20410ES80 （1000 U）
20410-A	SUMO Protease（1U/μL）	100 μL	500 μL	1000 μL
20410-B1	10×Protease Buffer（-salt）	200 μL	1000 μL	2 mL
20410-B2	10×Protease Buffer（+salt）	200 μL	1000 μL	2 mL

注：该酶酶活定义使用10×Protease Buffer（-salt）。SUMO Protease在10×Protease Buffer（-salt）中活性相对较高，但对于不稳定的底物应选择10×Protease Buffer（+salt），我们也提供了+salt的反应缓冲液20410-B2，请根据您的实验选择正确的缓冲液。20410-B2：500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT；20410-B1：500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、10 mM DTT；

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	SUMO蛋白酶
英文别名（English synonym）	SUMO Protease
来源（Source）	大肠杆菌表达
标签（label）	多聚His标签
纯度（Purity）	经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度> 90%
分子量（Molecular weight）	26.55 kDa
储存缓冲液（Buffer）	25 mM Tris-HCl, pH 8.0、0.1% Igepal (NP-40)、250 mM NaCl、500 μM DTT、50% 甘油
酶活定义（Unit Definition）	30℃，SUMO Protease 1小时酶切5 μg含有酶切位点的融合蛋白，酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位，即1U。

 

运输和保存方法

干冰运输；-80℃保存,有效期1年；避免反复冻融。

 

使用方法

1.在EP管中配制如下反应体系

组分	体积（反应体系可等比例缩减）
融合蛋白	50 μg
10×Protease Buffer（常规条件下B1）	20 μL
ddH2O	to 200 μL
SUMO Protease （1U/μL）	10 μL
Total volume	200 μL

2. 30℃孵育，在1、2、4和6小时分别吸出20 μL上述反应液，置于单独的EP管中。

3. 向上述EP管中加入20 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。

4. 样品全部反应完毕后，样品煮沸5 min，取30 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。

【注】如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，延长反应时间，并增加SUMO酶用量，以保证酶切效果。

表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性

反应时间（h）	不同温度下剪切活性（%）
	4℃	16℃	25℃	30℃
0.5	48	73	83	88
1	60	87	90	93
2	71	94	94	95
3	74	95	95	95

 

注意事项

1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.本产品仅作科研用途！

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