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双碱性内切酶又称为Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母体内Kex2蛋白酶负责加工killer toxin和α-factor的前体,是一种钙离子依赖型的丝氨酸蛋白酶,能特异性识别和切割Arg-Arg、Lys-Arg等双碱性氨基酸羧基端肽键。与胰蛋白酶不同,Kex2不能识别和切割单一碱性氨基酸即精氨酸或赖氨酸的羧基端肽键。Kex2蛋白酶活性不受常规的丝氨酸蛋白酶抑制剂如抑肽酶、PMSF、TPCK所抑制。
翌圣重组Kex2蛋白酶是由毕赤酵母表达,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,与天然的酿酒酵母Kex2酶具有相同的酶特异性。最适作用pH为pH9.0,稳定储存的pH为5.0-6.0。
翌圣此款重组Kex2蛋白酶以冻干粉形式供货,2~8度保存。另外,翌圣还提供液体形式的重组Kex2蛋白酶(Cat#20385ES),浓度为 1 mg/mL,方便客户直接使用。
| 来源(Source) | 毕赤酵母表达 |
| 分子量(Molecular Weight) | 理论值67.0±6.7 kDa |
| 外观(Appearance) | 白色、类白色粉末 |
| 酶浓度(Enzyme Concentration) | ≥10.0 units/mg pro |
| 活性定义(Activity Definition) | 25℃,50 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,pH 8.0的3 mL反应体系中,每分钟催化底物Boc-QRR-pNA释放出1 μmoL对硝基苯胺(4-nitroaniline)的酶量定义为一个酶活单位(Unit) |
| 质量保证(Quality assurance) | SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;不含其他蛋白酶,无非特异性切割 |

图1. 翌圣Kex2酶&羧肽酶B(Cat#20417ES)酶切P29-Arg34GLP-1(9-37),适配串联工艺需求,产量高,纯度高
冻干粉2~8℃保存,避光,防潮,有效期1年。
溶解保存缓冲液(20 mM NaAc-HAc,pH 5.2,2 mM Ca2+),溶解后存于-20℃以下,建议分装保存,避免反复冻融。
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