推荐应用
UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)是在大肠杆菌中表达纯化的重组猪源RNase抑制剂,通过与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活,能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL) (Cat#14604ES)及各种DNA Polymerase兼容。UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)经过翌圣生物UCF.ME®超低残留工艺处理,宿主残留更低,适合对背景菌要求更为严格的应用场景,如病原微生物检测等。
1、储存液不含NP40,DTT浓度极低,尤其适用于对单细胞/低投入量RNA建库;
2、UCF.ME®超低残留:大肠杆菌DNA残留水平<0.1 copies/100 U;无核酸外切酶、切口酶、RNase残留;
3、兼容RT-qPCR应用体系:在投入量为20 U/T时对RT-qPCR检测体系无影响;
4、兼容NGS应用体系:建库产量及宿主DNA残留优于进口品牌。
酶储存液组分
20m M Hepes-KOH,150mM KCl,8mM DTT,0.01%TritonX-100,50% Glycerol,pH7.5 @ 25°C。
1、E.coli基因组DNA残留< 0.1 copies/100 U,显著低于常规版本
对不同批次的UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)基因组DNA残留检测,并与常规Murine RNase inhibitor的宿主残留水平对比,结果显示UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)宿主基因组DNA残留显著低于显著低于常规Murine RNase inhibitor。

图1 UCF.ME® Swine RNase Inhibitor与常规版Murine RNase inhibitor中E.coli基因组残留检测结果对比
2、8U/T投入量能有效抑制50ng RNase A
以Total RNA为模板,配制RT-qPCR反应体系,验证UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)消化RNaseA能力,结果表明UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)能有效抑制RNase A。

图2 UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)对RNase抑制能力验证
3、兼容RT-qPCR反应体系:在投入量为20 U/T时对RT-qPCR检测体系无影响
以Total RNA为模板,配制RT-qPCR反应体系,验证UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)对RT-qPCR扩增的抑制作用,结果表明UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)在投入量为20 U/T时对RT-qPCR检测体系无影响。

图3 UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)对RT-qPCR抑制作用验证
4、兼容NGS应用体系:建库产量及宿主DNA残留优于进口品牌
UCF.ME® Swine RNase Inhibitor (Cat#14675ES)搭配翌圣全能型逆转录酶Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL) (Cat#14604ES)应用于RNA建库,建库产量高于进口品牌,测序数据质量相当且宿主DNA残留更低。


图4 14675ES搭配14604ES应用于RNA-seq建库产量 图5 14675ES搭配14604ES应用于RNA-seq测序质量
-25~-15℃保存,有效期2年。
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