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COA
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热敏UDG（尿嘧啶-DNA糖基化酶）能催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基与糖磷酸骨架间的N-糖苷键，释放游离的尿嘧啶。与普通UDG酶相比，热敏UDG可以避免常规UDG酶灭活后残留活性对含dU扩增产物的降解作用。本产品对温度敏感，55℃孵育5min或50℃孵育10min处理可完全失活。另外，UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile经过翌圣生物UCF.ME®超低残留工艺处理，大肠宿主DNA残留极低，适合对病原微生物检测等领域的需求。
产品信息
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货号 |
14466ES60 / 14466ES76 / 14466ES96 |
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规格 |
100 U / 500 U / 10,000 U |
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活性定义 |
以25℃，30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位（U） |
组分信息
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产品名称 |
14466ES60 |
14466ES76 |
14466ES96 |
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UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL |
100 μL |
500 μL |
10 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用说明
- 反应体系
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组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
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10×PCR Buffer (Mg2+ Plus) |
5 |
1× |
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25 mM MgCl2 |
3 |
1.5 mM |
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dUTP (10 mM) |
3* |
0.6 mM |
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dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each) |
1 |
0.2 mM each |
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模板DNA |
Optional |
- |
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引物1 (10 μM) |
2 |
0.4 μM |
|
引物2 (10 μM) |
2 |
0.4 μM |
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Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5 |
0.05 U/μL |
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UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL |
1 |
1 U/50 μL |
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ddH2O |
Up to 50 |
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*根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。
- PCR反应：
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反应温度 |
反应时间 |
循环数 |
目的 |
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25℃ |
10 min* |
1 |
降解含U模板 |
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94℃ |
2 min |
1 |
UDG酶失活，模板预变性 |
|
95℃ |
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30-35 |
变性 |
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60℃ |
20 sec |
退火 |
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72℃ |
30 sec/kb |
延伸 |
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72℃ |
5 min |
1 |
终延伸 |
*25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整
注意事项
1. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性；
2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
3. 本产品仅做科研用途；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Ver.CN20230601
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