产品简介

 

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）是专门针对贴壁细胞设计开发的减血清培养基（使用时仅需添加2.0%血清）。相较常规培养方案，CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清的培养方案在保持相同/略高目标蛋白表达情况下，减少80%血清用量，大大降低完全培养基成本。

 

组分信息

 

组分名称	40145ES80
CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）	1000 mL

 

储存条件

 

2~8℃，避光保存，有效期12个月。

 

使用说明

 

一、制备完全培养基

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清，使用前预热至37℃。

二、细胞复苏与传代

1. 在37℃水浴中快速融化冻存的细胞，待冻存管底部余下米粒大小冰块便可取出（全程<2min）。用70%乙醇对冻存管外部消毒。
2. 将冻存管中的细胞液全部转移至15 mL无菌离心管中，加入9mL完全培养基，混匀，800rpm离心5 min，弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬在1mL完全培养基中，混匀，取样计数。剩余细胞悬液全部转移至预先加入9mL完全培养基的T25培养瓶中，混匀，静置于培养箱（37℃，5 - 8% CO2）中培养。
4. 待汇合度达到80 - 90% ，即可按如下步骤进行传代。
5. 从培养瓶中吸弃旧培养基，加入1mL 常温 PBS润洗后吸弃。
6. 添加 1 mL的0.25%Trypsin-EDTA，室温孵育 30-60s至细胞开始滑落。
7. 添加 5 mL完全培养基终止细胞消化反应，轻轻吹打瓶壁收集细胞。将细胞悬液转移到15 mL 无菌离心管中，800rpm 离心5 min，弃上清。
8. 将细胞沉淀重悬在1 mL完全培养基中，混匀成单细胞悬液，计数后补加新鲜完全培养基制备指定密度的细胞悬液。

三、细胞驯化与冻存

1. 使用常规培养方法（DMEM+10.0%血清）冻存或培养的293贴壁细胞，替换至本产品时，建议按照如下流程进行驯化。
2. 将细胞接种到预热的完全培养基中，置于37℃，5 - 8% CO₂培养箱培养。推荐接种密度（4 - 8）×10⁴cells/cm²。
3. 当细胞汇合度达到80 - 90%时，继续传代细胞。
4. 经过2 - 3次传代后，293贴壁细胞基本均可适应CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）完全培养基。
5. 选择处于对数生长期、活率>90%的细胞，以（1 - 5）×10⁶cells/mL冻存于Serum-Free CellStore Freezing 无血清细胞冻存液（40151ES）中。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 细胞应及时传代。如果细胞密度很高，会导致细胞状态下降，死亡细胞增多，细胞碎片增多，细胞聚集。

 

 

Ver.CN20240922