产品简介

 

MolPure® Magnetic Spots DNA Kit磁珠法干血斑DNA提取试剂盒适用于从干血斑或血卡样本中提取高纯度的基因组 DNA，该方法采用磁珠纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，安全无毒且快捷。得到的产物可直接用于 PCR、qPCR、文库构建等实验。配合磁珠法自动化提取仪器使用，可实现核酸的高通量提取。

 

组分信息

 

类别	组分编号	组分名称	18554ES48
Part Ⅰ	18554-A	蛋白酶K	1.1 mL/支×1
Part Ⅱ	18554-B	磁珠悬浮液	1.1 mL/支×1
	18554-C	裂解液	30 mL/瓶×1
	18554-D	裂解结合液	35 mL/瓶×1
	18554-E	洗涤液A	40 mL/瓶×1
	18554-F	洗涤液B	77 mL/瓶×1
	18554-G	洗脱液	5 mL/瓶×1

 

储存条件

 

Part Ⅰ，18554-A蛋白酶 K ，2~8℃保存，室温运输，有效期为 18 个月。

Part Ⅱ，室温保存，室温运输，有效期为 18 个月。

 

注意事项

 

1. 本试剂盒中的多种缓冲液含有胍盐，为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。并按照安全标准预防措施来处理。不要让缓冲液接触到皮肤、眼睛以及黏膜，如果确实发生，请立即用大量清水清洗并就医。
2. 如果溶液出现沉淀，需要 30℃水浴至沉淀完全溶解后方可使用。
3. 如果裂解液出现沉淀，可 60℃水浴至沉淀完全溶解后方可使用。
4. 如果磁珠悬浮液冻结，请勿使用。
5. 本试剂盒中的多种缓冲液含胍盐，请勿用氧化性消毒剂如次氯酸钠进行处理，否则会释放有毒气体，须按医疗废物

进行处理。

6. 洗脱时可能存在磁珠残留，吸取样本时应尽量避免吸入磁珠。

 

样本说明

 

1. 适用标本类型：干血斑/血卡。
2. 标本保存和运输：标本可立即用于测试，也可以保存于-70℃或更低温度待测，保存期为 6 个月，应避免反复冻融。标本运输采用冷链运输。
3. 冻融要求：速冻速融，避免反复冻融。

 

实验步骤

 

1. 试剂准备

1.1实验前检查溶液是否有沉淀，磁珠是否能重悬。

2. 操作步骤

2.1 用打孔器在 FTA Card 或血片上打 3~5 个 3 mm 直径的血片，如无打孔器，需将血片剪碎。转移至 1.5 mL 或

2.0 mL 离心管中。

2.2 加入 400 μL 裂解液、20 μL 蛋白酶 K，高速涡旋混匀 30 s，检查确保血片浸没在溶液中。75℃振荡温浴 45

min，若恒温仪无振荡功能，可在温浴期间每 15 min取出涡旋 1 次，每次 30 s。

2.3 待温浴后的溶液降至室温后，瞬时离心收集管盖液滴至管中。

2.4 将所有溶液转移至新的离心管中，避免吸到沉淀。

2.5 加入 600 μL裂解结合液、20 μL磁珠悬浮液，振荡或涡旋 5~7 min使磁珠吸附 DNA。

2.6 转移至磁力架上进行磁分离至溶液透亮，吸弃溶液。

2.7 加入 700 μL洗涤液 A，涡旋 10 s打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清，吸弃溶液。

2.8 加入 700 μL 洗涤液 B，涡旋 10 s打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清，吸弃溶液。

2.9 再次加入 700 μL 洗涤液 B，涡旋 10 s打散磁珠后转至磁力架进行磁分离至溶液澄清，吸弃溶液。

2.10 掌上离心机瞬时离心后，转至磁力架上吸附至溶液澄清，充分吸弃所有溶液，打开管盖，空气干燥 3~5 min。

注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。切勿干燥过久，以免影响后续洗脱效果。

2.11 加入 30~50 μL 洗脱液，高速涡旋 2~3 min打散磁珠。

2.12  60℃温浴 5 min，然后高速涡旋 30 s。

2.13 瞬时离心收集管盖液滴至管中，转移至磁力架上进行磁分离。

2.14 把基因组 DNA 溶液转移至新的离心管中待用。如果不立即使用，请存储于-15~-25℃，长期保存请放置于-70℃或

更低的温度。

 

Ver.CN20240607