产品简介

 

MolPure® Mag Plant DNA Kit磁珠法通用植物DNA提取试剂盒适用于大部分植物组织DNA提取，主要包括叶片、果实、种子、根茎、真菌等。采用独特的磁珠和精心优化的缓冲体系，可最大限度的分离纯化样本中的基因组DNA。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提。提取的核酸纯度高，质量稳定可靠，适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR、建库等。配合磁珠法自动化提取仪器使用，可实现核酸的高通量提取。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	18529ES20	18529ES50	18529ES70
18529-A	裂解液	14 mL/瓶×1	35 mL/瓶×1	140 mL/瓶×1
18529-B	絮凝剂	3 mL/瓶×1	7 mL/瓶×1	30 mL/瓶×1
18529-C	洗涤液A	13 mL/瓶×1	32 mL/瓶×1	130 mL/瓶×1
18529-D	洗涤液B	6 mL/瓶×1	15 mL/瓶×1	60 mL/瓶×1
18529-E	洗脱液	3 mL/瓶×1	7 mL/瓶×1	30 mL/瓶×1
18529-F	磁珠悬浮液	0.5 mL/管×1	1.2 mL/管×1	5 mL/瓶×1

注：20T：使用前洗涤液B(18529-D)每瓶需加入24 mL无水乙醇

50T：使用前洗涤液B(18529-D)每瓶需加入60 mL无水乙醇

200T：使用前洗涤液B(18529-D)每瓶需加入240 mL无水乙醇

 

储存条件

 

F组分（磁珠悬浮液）2~8℃保存，其余组分室温保存，有效期18个月。

备注：室温运输。

 

注意事项

 

1. 首次使用前请按瓶身标签注明的体积向洗涤液 B瓶中加入无水乙醇，并做好标记。
2. 需自备异丙醇和RNase A（货号：10406ES03）。
3. 使用前注意观察裂解液、絮凝剂和洗涤液A中是否有析出，如有上述情况可50℃加热至溶液澄清，避免影响使用效果。
4. 洗脱时可能存在磁珠残留，推荐适当调整样本投入量，且吸取洗脱液时应尽量避免吸入磁珠。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
6. 本产品仅作科研用途！

 

使用说明

 

第一部分：样本处理

1.1 加入 600 µL 裂解液和 5 µL RNase A 至 1.5 mL 离心管中，混匀后室温备用。

1.2 用液氮将样品研磨成粉末状，转移 50~100 mg 粉末至 1.5 mL 离心管中。

1.3 涡旋震荡1 min，静置5 min。

1.4加入100 µL絮凝剂，震荡15 s，冰浴5 min。常温，13000 rpm(~16000 g)离心5 min。

 

第二部分：单管操作

2.1转移500 µL上清液（1.4步骤）至新的1.5 mL离心管。

2.2加入450 µL异丙醇和20 µL磁珠（加入前充分混匀），25℃ 1600 rpm涡旋5 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸弃溶液。

2.3加入600 µL洗涤液A，25℃ 1600 rpm涡旋1 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸弃溶液。

2.4加入600 µL洗涤液B，25℃ 1600 rpm涡旋1 min。置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，吸弃溶液。

2.5重复步骤2.4

2.6短暂离心收集管壁上液滴，转移至磁力架上，吸尽残液。空气干燥5-10 min。

2.7加入100 µL洗脱液，涡旋打散磁珠。65℃ 1600 rpm 震荡孵育10 min。

2.8置于磁力架上吸附1 min，待磁珠完全吸附，小心将液体转移至新的离心管，即得到核酸溶液。

2.9核酸溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。

 

第三部分：翌圣AP-96N核酸提取仪操作

3.1 准备5块 96 孔板，将瓶装试剂分装至 96 孔板对应的孔中，按如下表格分装：

板位	板名称	试剂名称	投入量	备注
1	结合板	异丙醇	0.9倍上清体积	例：上清500µL，加入450µL异丙醇
2	漂洗板1	洗涤液A	600 µL
3	/	/	/
4	漂洗板2	洗涤液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混匀
5	漂洗板3	洗涤液B	600 µL
6	洗脱板	洗脱液	100 µL

注意：每个板子加入的孔位需要一致。

3.2 转移500 µL上清液（1.4步骤）至结合板对应孔位中。

3.3 把磁棒套插到仪器中。把5块板子放到仪器相应位置。启动程序。

3.4 程序结束后，将洗脱板中的洗脱液转移至新的离心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。

 

AP-96N核酸提取仪的提取程序

步骤	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	4	1	2	4	5	6	6	4
等待时间	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 2	M 1	M 2	M 2	M 2	M 3	M 3	M 1
混合时间	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暂停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁时间	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
体 积	600	1000	600	600	600	100	100	600
温 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

混合模式M1:混合时间10 s，混合速度200000

混合模式M2:混合时间10 s，混合速度300000

混合模式M3:混合时间10 s，混合速度400000

 

第四部分：翌圣AP-48核酸提取仪操作

4.1 将瓶装试剂分装至 96 孔板对应的孔中，按如下表格分装：

列	名称	试剂名称	投入量	备注
1/7	结合	异丙醇	0.9倍上清体积	例：上清500µL，加入450µL异丙醇
2/8	漂洗1	洗涤液A	600 µL
3/9	漂洗2	洗涤液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混匀
4/10	漂洗3	洗涤液B	600 µL
5/11	洗脱	洗脱液	100 µL

4.2 转移500 µL上清液（1.4步骤）至1/7列对应孔位中。

4.3把磁棒套插到仪器中，把板子放到仪器相应位置。启动程序。

4.4 程序结束后，将洗脱孔（5/11列）中的洗脱液转移至新的离心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。

AP-48核酸提取仪的提取程序

步骤	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	3	1	2	3	4	5	5	3
等待时间	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 2	M 1	M 2	M 2	M 2	M 3	M 3	M 1
混合时间	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暂停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁时间	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
体 积	600	1000	600	600	600	100	100	600
温 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

混合模式M1:混合时间10 s，混合速度200000

混合模式M2:混合时间10 s，混合速度300000

混合模式M3:混合时间10 s，混合速度400000

 

第五部分：翌圣AP-16S核酸提取仪操作

5.1 将瓶装试剂分装至 96 孔板对应的孔中，按如下表格分装：

列	名称	试剂名称	投入量	备注
1/7	结合	异丙醇	0.9倍上清体积	例：上清500µL，加入450µL异丙醇
2/8	漂洗1	洗涤液A	600 µL
3/9	漂洗2	洗涤液B+磁珠	600 µL+20 µL磁珠	磁珠加入前充分混匀
4/10	漂洗3	洗涤液B	600 µL
5/11	洗脱	洗脱液	100 µL

5.2 转移500 µL上清液（1.4步骤）至1/7列对应孔位中。

5.3把磁棒套插到仪器中，把板子放到仪器相应位置。启动程序。

5.4 程序结束后，将洗脱孔（5/11列）中的洗脱液转移至新的离心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。

翌圣16通道自动化核酸提取仪AP-16S提取程序

步骤	第 1 步	第 2 步	第 3 步	第 4 步	第 5 步	第 6 步	第 7 步	第 8 步
工 位	3	1	2	3	4	5	5	3
等待时间	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:00:00	00:02:00	00:00:00	00:00:00
混合模式	M 3	M 2	M 3	M 3	M 3	M 4	M 4	M 2
混合时间	00:00:15	00:05:00	00:02:00	00:01:30	00:01:30	00:05:00	00:00:00	00:00:20
是否暂停	否	否	否	否	否	否	否	否
吸磁时间	00:00:30	00:01:30	00:00:30	00:00:30	00:00:30	00:01:30	00:01:30	00:00:00
体 积	600	1000	600	600	600	100	100	600
温 度	--	--	--	--	--	65℃	65℃	--

 

Ver.CN20240729