病原核酸提取VS病毒核酸提取
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2026-03-23
核酸提取是分子诊断、疫病监测、病原学研究的核心前置步骤，其提取效率、纯度直接决定下游PCR、qRT-PCR、高通量测序等技术的准确性与灵敏度。在临床诊断中，感染病的检测常需兼顾“单一病原感染”和“混合感染”，例如人类呼吸道感染可能同时存在病毒和细菌感染，此时病原核酸提取技术的“广谱性”就显得尤为重要，需同时提取样本中病毒、细菌等多种病原的核酸，为精准诊断和对症治疗提供依据。与人类临床诊断相比，兽医诊断的样本复杂性更高、场景更特殊，核酸提取技术是核心支撑手段——病毒核酸提取主要用于单一动物病毒疫病的确诊和载量监测（如非洲猪瘟病毒、高致病性禽流感病毒检测），病原核酸提取则用于多病原筛查和未知病原鉴定（如动物混合感染检测），二者的合理应用，直接决定了兽医诊断的准确性和时效性，对动物疫病的防控和净化具有重要意义。
图：新型冠状病毒电镜照片
病原是指能够引发感染的各类微生物，包括病毒、细菌、支原体、衣原体、真菌、寄生虫等，因此病原核酸提取的样本覆盖范围极广，且复杂性更高，核心特征体现在以下3点：
（1）样本来源多样：涵盖人类临床样本（血液、痰液、咽拭子、粪便、脑脊液、病变组织等）与动物疫病样本（血清、组织匀浆、粪便、鼻拭子、精液、胎盘组织等），不同样本的理化性质差异显著——如血液样本富含血红蛋白、血浆蛋白，粪便样本含有大量多糖、胆盐、微生物群落，病变组织样本则夹杂宿主细胞碎片、胶原纤维等。
（2）杂质种类繁多：除宿主细胞核酸（占比极高，常干扰目标病原核酸检测）外，还含有蛋白质、脂类、多糖、核酸酶、抑制剂（如粪便中的胆盐、血液中的血红蛋白，会抑制PCR酶活性）等，且不同病原对应的样本杂质差异较大，如真菌、细菌样本需额外去除细胞壁相关杂质，寄生虫样本则需破解虫卵外壳。
（3）目标核酸异质性强：病原核酸包括DNA（细菌、真菌、DNA病毒、寄生虫）与RNA（RNA病毒、支原体），且不同病原的核酸丰度差异极大——如结核分枝杆菌在痰液样本中丰度极低，而急性感染期的细菌样本中，目标核酸丰度较高；同时，不同病原的核酸结构差异显著，如细菌基因组为环状双链DNA，支原体为线性双链DNA，RNA病毒为单链或双链RNA，增加了提取难度。
病毒核酸提取的目标仅为病毒（包括DNA病毒、RNA病毒），样本复杂性相对较低，但因病毒自身结构特点，仍存在特定挑战，核心特征体现在以下3点：
（1）样本来源聚焦但病毒载量差异大：样本多为含病毒的体液、分泌物或组织匀浆（如人类咽拭子、血液、肺泡灌洗液，动物鼻拭子、组织匀浆、唾液等），虽来源相对集中，但病毒载量波动极大——如感染早期病毒载量极低，急性感染期载量较高，且部分病毒（如RNA病毒）易降解，进一步降低有效核酸丰度。
（2）杂质以宿主核酸和蛋白质为主：病毒多寄生在宿主细胞内，样本中除病毒核酸外，主要杂质为宿主细胞核酸（DNA/RNA）、宿主蛋白质，以及少量样本基质杂质（如拭子中的纤维、组织匀浆中的细胞碎片），相较于病原核酸提取，杂质种类更单一，主要干扰来自宿主核酸的污染。
（3）病毒结构影响核酸释放：病毒具有蛋白质衣壳，部分病毒（如包膜病毒）还含有脂质包膜，核酸被衣壳和包膜包裹，需通过特定裂解方式（如酶解、去污剂处理）破坏衣壳与包膜，才能释放核酸；不同病毒的衣壳厚度、包膜完整性差异较大，如RNA病毒衣壳较脆弱，而部分DNA病毒衣壳坚硬，裂解难度不同。
病原核酸提取的核心目标是高效提取样本中所有潜在病原的核酸（包括DNA、RNA），兼顾不同病原核酸的得率与纯度，尽可能减少宿主核酸、杂质的干扰，满足后续多病原筛查、高通量测序等需求，适用于混合感染检测、未知病原鉴定等场景。而病毒核酸提取的核心目标是特异性富集样本中的病毒核酸（DNA或RNA，根据病毒类型选择），最大限度去除宿主核酸、蛋白质等杂质，提高病毒核酸的纯度与浓度，满足病毒特异性检测（如qRT-PCR）、病毒测序等需求，适用于单一病毒感染确诊、病毒载量监测等场景。
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病原核酸提取 (Pathogen NA Extraction) |
病毒核酸提取 (Viral NA Extraction) |
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覆盖范围 |
病毒、细菌、真菌、寄生虫等所有病原体 |
仅针对病毒（DNA病毒和RNA病毒） |
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细胞结构 |
含细胞壁结构（细菌/真菌）或无细胞结构（病毒） |
无细胞结构，仅含蛋白质衣壳和包膜 |
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裂解难度 |
难度大：革兰阳性菌需酶解/机械破壁、寄生虫样本则需破解虫卵外壳 |
相对简单：主要破坏蛋白质衣壳 |
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核酸类型 |
DNA为主（细菌/真菌），或DNA/RNA（病毒） |
DNA或RNA（根据病毒类型） |
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宿主去除 |
常需差异裂解去除宿主细胞背景 |
富集策略不同，部分需宿主去除 |
为了应对上述挑战，翌圣提供高效、快速的病原核酸提取解决方案，帮助您解决病原提取中诸多难点，进一步提高病原检测的灵敏度。
MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒（18306ES）
（1）样本兼容性好：兼容拭子、全血、血浆、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液等样本；
（2）操作简便快速：单样本提取仅需40min；
（3）病原菌适用性广：化学法与机械法相结合，纯化的核酸（DNA/RNA）包括病毒、支原体、细菌、真菌等微生物；
（4）自动化程度高：搭配翌圣AP-96自动化提取仪器，完美释放双手。
产品性能展示：
图：血液样本中不同细菌的提取效率
提取肺泡灌洗液中细菌：将低拷贝数的白色念球菌、粪肠球菌、草分枝杆菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌，分别掺入肺泡灌洗液中，按18306和竞品A提取流程进行提取，使用qPCR法对提取得到的微生物核酸进行定量，检测的平均Ct值越低，表示检出率越高。结果显示：18306ES对肺泡灌洗液样本中不同微生物的提取效率优于竞品A。
图：肺泡灌洗液样本中不同细菌的提取效率
提取拭子样本中细菌：将低拷贝数的白色念球菌、粪肠球菌、草分枝杆菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌，分别掺入拭子样本中，按18306和竞品A提取流程进行提取，使用qPCR法对提取得到的微生物核酸进行定量，检测的平均Ct值越低，表示检出率越高。
结果显示：18306ES对拭子样本中不同微生物的提取效率优于竞品A。
图：拭子样本中不同细菌的提取效率
提取血浆样本中的细菌、真菌：将院内培养的金葡菌稀释10倍、100倍，真菌（镰刀菌、酵母菌）菌液稀释1000倍，以血浆作为基质，分别采用18306和竞品B提取之后，针对细菌、真菌特异性位点进行qPCR扩增，扩增的Ct值如下，结果显示：18306ES对金葡菌、镰刀菌提取的DNA得率与竞品B相当。
图：细菌和真菌的提取效率
MolPure® Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit 磁珠法通用病毒DNA/RNA提取试剂盒 （18521ES）
（1）样本兼容性好：兼容拭子、全血、血浆、肺泡灌洗液、脑脊液等样本；
（2）操作简便快速：搭配翌圣AP-96N自动化提取仪，20 min分钟内可实现96个样本的提取；
（3）高效灵敏：低拷贝样本的检出率高，降低漏检的风险。
产品性能展示：
动物疫病样本提取：将含有非洲猪瘟病毒阳性样本按18521和竞品B提取流程进行提取，使用qPCR法对ASFV进行定量，检测的平均Ct值越低，表示检出率越高。结果显示：针对非洲猪瘟样本，18521对提取效率优于竞品B。
图：非洲猪瘟不同样本的提取效率
人流感病毒样本提取：将含有腺病毒5型阳性样本、腺病毒7型阳性样本、呼吸道合胞病毒RSV阳性拭子样本，采用18521和竞品A提取流程进行提取，使用qPCR法对提取得到的病毒核酸进行定量，检测的平均Ct值越低，表示检出率越高。结果显示：针对人DNA和RNA病毒阳性样本，18521对提取效率优于竞品A。
图：拭子样本流感病毒的提取效率
【翌圣·病原核酸提取·产品选择指南】
