❖超高保真:保真性是Taq酶的83倍。
❖特异性强:热启动DNA聚合酶提高反应的特异性,扩增目的条带单一。
❖扩增速度快:极限扩增速度10 sec/kb,30 sec/kb可高效扩增绝大多数片段。
❖灵敏度高:可扩增低至1 pg模板。
❖稳定性好:37°C保存7 d,反复冻融50次,不影响产品性能。
❖操作方便:即用型预混液,室温加样,操作简便,保证了更好的重复性与准确性。
>保真性好:碱基突变少
图. 10154具有超高保真性,用10154和Taq酶同时进行扩增反应,对其产物(约250000个碱基)进行测序,10154ES仅有6个碱基发生错配,Taq酶错配碱基数为609个。
10154ES超高的保真性对于要求保真性的克隆等可以放心进行PCR扩增。
>扩增速度快
图. Hieff Canace® Plus高保真酶分别扩增水稻gDNA 2 kb片段和小鼠gDNA 4 kb片段。以不同速度进行扩增,结果显示,10154ES 10k/kb扩增速度下,能得到目的条带。M:1 kb DNA Marker(10510ES)。
>灵敏度高:可扩增低至1pg模板
图. Hieff Canace® Plus高保真酶扩增质粒500 bp片段,不同模板量(1 pg-0.5 μg)均可有效扩增,灵敏度低至1 pg。NC:阴性对照。M:100 bp DNA Marker。
南京农业大学
同济大学
客户:Marker是1.5kb的,两条都是目的带,剪切变体;翌圣的产量高,测序结果无突变;模板为水稻cDNA,目的条带为500bp/750bp,体系为50μL。
FAQ
Q:Canace 具有保真性的原理?
A:具有 3’-5’的核酸外切酶活性,有校正功能。
Q:Canace 扩增后是平末端产物,如何加 A 尾?
A:仅供参考:先对平末端PCR产物纯化后,浓度要求至少20ng/uL(跑胶图像条带清晰,明亮即可),取 14.5 uL PCR 产物,加入 2 uL Taq Buffer,3uL dNTP,0.5 uL Taq酶,在72℃反应10~20min,后直接回收纯化加A尾的DNA片段。
Q:Canace 可以用于酵母菌液吗?
A:不建议用。若要用则需通过煮沸,反复冻融,加蜗牛酶等等处理方法破壁后尝试。
Q:Canace 能用于多少长度的片段?
A:验证范围内长度理论上是可以的(验证范围:简单模板 20kb,复杂模板 10kb)。但具体能否扩出,还与模板和引物等有关。
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