Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit是新一代的同源重组克隆试剂盒，精心优化的2×Hieff Clone® Universal Enzyme Premix预混了重组酶和重组反应所需缓冲液，并添加了独特的重组增强因子，可显著提高重组克隆效率。

该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任何载体的任何位点，浓度可低至5 ng/μL，一次可实现多至6个片段的顺序拼接克隆。将载体线性化，并在插入片段正、反向PCR引物5’端引入15-25 bp的线性化载体末端同源序列，使得插入片段PCR产物5’和3’末端分别带有与线性化载体两末端对应的完全一致的序列。PCR产物和线性化载体在重组酶的作用下，仅需50℃，5-15 min即可完成重组反应。克隆阳性率可达95%以上。

• 定向：可满足1-6个DNA片段定向插入
• 简便：多片段连接一管内即可完成
• 快速：最快5分钟即可完成连接反应
• 高效：克隆生长数多，克隆阳性率可达95%以上

• 克隆生长数多，单片段克隆阳性率在95%以上

图1. Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit可以有效克隆单片段基因。A-B：重组转化平板。载体（pGEX4T-1，5 kb）和插入片段（2000 bp）摩尔比为1:3。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：5000 DNA Marker。载体量：5 ng/20 μL反应体系，反应条件：50℃,5 min。结果显示YEASEN产品性能媲美进口品牌。

• 2-6个多片段轻松克隆

图2. Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 进行两片段克隆。A-B：重组转化平板。载体（pLacZi，6.9 kb）和插入片段（0.5 kb和1 kb）摩尔比为1:3。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：15000 DNA Marker。载体量：5 ng/20 μL反应体系，反应条件：50℃,15 min。结果显示YEASEN产品的克隆数更多，克隆阳性率与进口品牌相当。

图3. Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 进行四片段克隆。A-B：重组转化平板。载体（pLacZi，6.9 kb）和插入片段（0.5 kb、0.5 kb和1 kb）摩尔比为1:3。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：5000 DNA Marker。载体量：5 ng/20 μL反应体系，反应条件：50℃,15 min。结果显示YEASEN产品的克隆数更多，克隆阳性率也优于进口品牌。

图4. Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 进行六片段克隆。A-B：重组转化平板。载体（pGEX4T-1，5 kb）和插入片段（0.5 kb、0.5 kb、0.5 kb、0.5 kb、0.5 kb和1 kb）摩尔比为1:3。C：插入片段PCR鉴定电泳图，M：5000 DNA Marker。载体量：5 ng/20 μL反应体系，反应条件：50℃,30 min。结果显示YEASEN产品的克隆生长数和克隆阳性率远好于V品牌。

冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。