质粒大提技术是分子生物学研究及工业应用中的关键环节,旨在从工程菌中高效获取高纯度、低内毒素的质粒DNA。随着基因治疗、细胞疗法及疫苗开发的快速发展,市场对大规模、高质量质粒的需求激增。在细胞转染实验中,质粒大提技术是确保外源基因高效导入宿主细胞的核心环节。转染实验要求质粒DNA具备高纯度(A260/280≥1.8)与极低内毒素残留(通常≤0.1 EU/μg),以避免内毒素引发的细胞凋亡或假阳性信号。常规质粒提取方法常因内毒素残留超标(>5 EU/μg)或得率不足(<1 mg/次),导致转染效率下降或实验重复性差。
图1.细菌内的基因组DNA与质粒(网图)
翌圣生物推出的全新升级质粒大提试剂盒,通过三重去内毒素核心技术与高亲和力硅胶膜吸附系统,成功突破,最高产量达4 mg,内毒素残留稳定控制在<0.01 EU/μg。尤其适用于干细胞转染、病毒载体包装等对内毒素要求极低的场景,成为基因治疗领域“高产+超纯”质粒制备的新标杆。
产品简介
MolPure® Pro Endo-free Plasmid Maxi Kit (19038ES)适用于从50-200 mL培养液中快速提取0.5-4 mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率高达80-90%。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,高吸附性。搭配推杆过滤器,操作更简便,提取的DNA纯度高,内毒素残留极低(<0.01 EU/μg DNA),适用于常规及脆弱细胞转染,也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
产品亮点
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高效吸附:硅胶膜吸附柱容量高达4 mg;
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高纯度:质粒纯度高,无RNA残留;
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极低内毒素:提取质粒内毒素水平 <0.01 EU/μg,适用于干细胞的转染;
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操作方便:搭配推杆过滤器,无需小心吸取上清,质粒更纯净。
操作流程
图2.19038ES操作流程
产品性能
质粒浓度、纯度对比
均分的100 mL 菌液,分别用D*120、19038ES 提取,按照统一的体积洗脱,洗脱2次,每次用1.2 mL,将洗脱液分别收集到1.5mL离心管中保存。通过称重法准确确定各洗脱体积。回收的质粒采用Nanodrop测定浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳检测条带的完整性,鲨试剂做内毒素测试。
结果显示:19038对质粒的提取效率是竞品D*120的1.26倍,纯度相当。
内毒素残留对比
结果显示:19038的内毒素残留极低,低于0.01EU/μg,电泳图的亮度与定量的浓度符合,超螺旋比例高,无RNA残留。
客户测试反馈
中科院***课题组
反馈之声
翌圣质粒大提试剂盒体验感非常好!
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200 mL的菌液可回收1.8 mg的质粒,纯度好,内毒素残留低,满足实验室日常转染!
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操作很方便,推杆过滤器轻松一拉,可过滤到菌体杂质!
新品推荐
货号 |
产品名称 |
规格 |
特点和应用 |
19037ES |
MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit V2 无内毒素质粒大量提取试剂盒V2 |
2 T/ 10 T |
全程约40 min,操作简便,用于常规细胞转染 |
MolPure® Pro Endo-free Plasmid Maxi Kit 超纯无内毒素质粒大量提取试剂盒 |
2 T/ 10 T |
全程约1 h,深度去内毒素,用于脆弱细胞转染 |