Commassie Blue Fast Stain Solution(No heating) 考马斯亮蓝快速染色液(无需加热)

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产品说明书

FAQ

COA

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产品简介

 

考马斯亮蓝快速染色液(无需加热,10×)是基于考马斯亮蓝染色法对蛋白质进行染色而设计的,应用于变性或非变性蛋

白电泳的凝胶染色,所用染料为考马斯亮蓝G250,不含甲醇,醋酸等有毒或有刺激性物质。

本产品染色速度快,灵敏度高,无需加热和脱色,5 min即可显色质量约100 ng的蛋白质,30 min可检测10 ng的蛋白

质。凝胶染色会有蓝绿色背景,用自来水冲洗掉残余染色液即可观察或拍照,若在旋转摇床上用清水漂洗若干次,可将残余的微弱背景彻底去除。

 

储存条件

 

室温保存,有效期1年。

 

使用说明

 

1.染色液配制:在装有225 mL去离子水或蒸馏水的瓶中倒入本产品提供的25 mL染色原液,混匀后2~8℃放置,即为染色液工作液,使用前请上下颠倒混匀。

2. 剥下电泳完毕的SDS-PAGE,或native-PAGE胶,放在比凝胶稍大的塑料盒中。

3.加入25 mL染色液,缓慢摇床震荡15 min,即可完成染色,染色30 min即可肉眼观察到约10 ng的蛋白条带,继续染色可增加颜色深度,但不会增加灵敏度,染色2 h,即可达到最大染色深度。

4.倒去染色液,用自来水冲洗掉残余染色液即可观察或拍照,若在旋转摇床上用清水漂洗若干次,可将残余的微弱背景彻底去除,也可持续脱色,直至达到需要的背景。

 

注意事项

 

1.本产品使用考马斯亮蓝G250染色,此种染料是与蛋白质中的碱性氨基酸结合,如果蛋白中没有这类氨基酸,则无法使用

本产品对蛋白进行染色。

2.本产品如果长时间静置,染料会慢慢向下沉降,在使用前请上下翻转摇匀,保证染色效果一致。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4.本产品仅作科研用途.

 

附录1 蛋白染色选购表

货号

20310ES

20203ES

20308ES

20309ES

36244ES

名称

考马斯亮蓝R250

考马斯亮蓝G250

考马斯亮蓝快速染色液(无需加热)

考马斯亮蓝快速染色液(8分钟)

蛋白质银染试剂盒

原理

通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。

银离子在碱性 pH 环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。

应用

电泳蛋白染色

蛋白质含量测定

变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色

变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色及蛋白质谱分析

检测聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶中的微量蛋白质

优点

染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1 µg蛋白。

条带快速显色,且背景颜色很浅不需要做褪色处理。操作快速、方便。

不含甲醇或乙酸等刺激成分,灵敏度高,无需加热。

不含甲醇或乙酸等刺激成分,8-10分钟即可完成PAGE胶上蛋白染色,无需脱色。

检测灵敏度更高,可检测到10-100 ng蛋白质,比考马斯亮蓝染色法灵敏100多倍

缺点

R250染色后需要脱色(有机试剂),才能进行蛋白条带的观察。

灵敏度低,检测下限为0.5 µg。

染色时间约30 min-1 h,需要脱色(蒸馏水20-40 min)

染色过程中必须加热

操作较繁琐

附录2 蛋白电泳相关选购表

实验步骤

重点推荐试剂

样品制备

RIPA裂解液(强)(Cat#20101ES

WB/IP裂解液   (Cat#20118ES

细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒(Cat#20126ES

细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒(Cat#20127ES

组织/细胞线粒体分离试剂盒  (Cat#20128ES

磷酸酶抑制剂混合物(100×, 储存液)(Cat#20109ES

蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,迷你型,片剂(Cat#20123ES

蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,100×DMSO储液(Cat#20124ES

去乙酰化酶抑制剂 Cocktail (100× in 70% DMSO)(Cat#20140ES

蛋白定量

BCA蛋白浓度测定试剂盒(即用型)(Cat#20200ES

BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)Cat#20201ES

Bradford蛋白浓度测定试剂盒Cat#20202ES

蛋白电泳

5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液Cat#20315ES

PAGE凝胶快速制备试剂盒(Cat#20324ES-20327ES

10×快速电泳液(Cat#36127ES

高分辨率预制胶(Bis-Tris)(Cat#36259ES-36280ES

三色预染蛋白Marker(8-180 kDa)Cat#20350ES

电泳相关仪器

EpPlus 增强型电泳仪电源(Cat#80311ES

PET 2 两块胶蛋白迷你垂直电泳槽(Cat#80210ES

PET 4 四块胶蛋白迷你垂直电泳槽(Cat#80211ES

BlotⅠ 迷你垂直转印槽(Cat#80220ES

 

 

Ver.CN20241216

 

400-6111-883