产品简介
考马斯亮蓝快速染色液(无需加热,10×)是基于考马斯亮蓝染色法对蛋白质进行染色而设计的,应用于变性或非变性蛋
白电泳的凝胶染色,所用染料为考马斯亮蓝G250,不含甲醇,醋酸等有毒或有刺激性物质。
本产品染色速度快,灵敏度高,无需加热和脱色,5 min即可显色质量约100 ng的蛋白质,30 min可检测10 ng的蛋白
质。凝胶染色会有蓝绿色背景,用自来水冲洗掉残余染色液即可观察或拍照,若在旋转摇床上用清水漂洗若干次,可将残余的微弱背景彻底去除。
储存条件
室温保存,有效期1年。
使用说明
1.染色液配制:在装有225 mL去离子水或蒸馏水的瓶中倒入本产品提供的25 mL染色原液,混匀后2~8℃放置,即为染色液工作液,使用前请上下颠倒混匀。
2. 剥下电泳完毕的SDS-PAGE,或native-PAGE胶,放在比凝胶稍大的塑料盒中。
3.加入25 mL染色液,缓慢摇床震荡15 min,即可完成染色,染色30 min即可肉眼观察到约10 ng的蛋白条带,继续染色可增加颜色深度,但不会增加灵敏度,染色2 h,即可达到最大染色深度。
4.倒去染色液,用自来水冲洗掉残余染色液即可观察或拍照,若在旋转摇床上用清水漂洗若干次,可将残余的微弱背景彻底去除,也可持续脱色,直至达到需要的背景。
注意事项
1.本产品使用考马斯亮蓝G250染色,此种染料是与蛋白质中的碱性氨基酸结合,如果蛋白中没有这类氨基酸,则无法使用
本产品对蛋白进行染色。
2.本产品如果长时间静置,染料会慢慢向下沉降,在使用前请上下翻转摇匀,保证染色效果一致。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途.
附录1 蛋白染色选购表
货号 |
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名称 |
考马斯亮蓝R250 |
考马斯亮蓝G250 |
考马斯亮蓝快速染色液(无需加热) |
考马斯亮蓝快速染色液(8分钟) |
蛋白质银染试剂盒 |
原理 |
通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。 |
银离子在碱性 pH 环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。 |
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应用 |
电泳蛋白染色 |
蛋白质含量测定 |
变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色 |
变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色及蛋白质谱分析 |
检测聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶中的微量蛋白质 |
优点 |
染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1 µg蛋白。 |
条带快速显色,且背景颜色很浅不需要做褪色处理。操作快速、方便。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分,灵敏度高,无需加热。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分,8-10分钟即可完成PAGE胶上蛋白染色,无需脱色。 |
检测灵敏度更高,可检测到10-100 ng蛋白质,比考马斯亮蓝染色法灵敏100多倍 |
缺点 |
R250染色后需要脱色(有机试剂),才能进行蛋白条带的观察。 |
灵敏度低,检测下限为0.5 µg。 |
染色时间约30 min-1 h,需要脱色(蒸馏水20-40 min) |
染色过程中必须加热 |
操作较繁琐 |
附录2 蛋白电泳相关选购表
实验步骤 |
重点推荐试剂 |
样品制备 |
RIPA裂解液(强)(Cat#20101ES) |
WB/IP裂解液 (Cat#20118ES) |
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细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒(Cat#20126ES) |
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细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒(Cat#20127ES) |
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组织/细胞线粒体分离试剂盒 (Cat#20128ES) |
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磷酸酶抑制剂混合物(100×, 储存液)(Cat#20109ES) |
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蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,迷你型,片剂(Cat#20123ES) |
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蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,100×DMSO储液(Cat#20124ES) |
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去乙酰化酶抑制剂 Cocktail (100× in 70% DMSO)(Cat#20140ES) |
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蛋白定量 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(即用型)(Cat#20200ES) |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)(Cat#20201ES) |
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Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Cat#20202ES) |
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蛋白电泳 |
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(Cat#20315ES) |
PAGE凝胶快速制备试剂盒(Cat#20324ES-20327ES) |
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10×快速电泳液(Cat#36127ES) |
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高分辨率预制胶(Bis-Tris)(Cat#36259ES-36280ES) |
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三色预染蛋白Marker(8-180 kDa)(Cat#20350ES) |
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电泳相关仪器 |
EpPlus 增强型电泳仪电源(Cat#80311ES) |
PET 2 两块胶蛋白迷你垂直电泳槽(Cat#80210ES) |
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PET 4 四块胶蛋白迷你垂直电泳槽(Cat#80211ES) |
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BlotⅠ 迷你垂直转印槽(Cat#80220ES) |
Ver.CN20241216
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