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Gold Band Plus 3-color Regular Range Protein Marker (8-180 kDa) 三色预染蛋白质分子量标准(8-180 kDa)
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产品介绍

YEASEN加强版彩色版蛋白Marker,彩色预染蛋白分子量标准包含了从8 kDa到180 kDa共10种高度纯化并预染的重组蛋白质(8,17,25,33,43,55,72,100,130,180 kDa),其中72 kDa条带为橙红色,8 kDa为绿色。标示表观分子量经过标准非预染蛋白质分子量Marker标定。使用本产品可动态观察蛋白电泳状态和转膜效果。经SDS-PAGE电泳后转移到PVDF膜、NC膜上可见清晰的彩色条带。

预染蛋白与染料结合后,在不同浓度凝胶中分子量大小会有所变化,说明书中有标识,本产品在用于判断目的蛋白分子量大小时仅供参考。

翌圣为您提供Western Blot实验整体解决方案,相关产品选购请参考:WB实验系列产品-选购指南

产品特色

颜色鲜明: 三色预染,保证亮度的前提下,条带更锐利。

偏移率低:不同的跑胶缓冲液中,蓝色基本稳定,红色和绿色符合常规。

上样量低:mini-gel仅需3-5 μL。

性能稳定:50℃处理20 h,无任何降解

应用案例

图1  电泳缓冲条件下,蛋白marker的指示图

图2  蛋白Marker(20350)不同批次间,效果稳定

图3  50℃处理20h,无任何降解


附表1  不同电泳缓冲液条件下,本产品各条带指示分子量


存储条件

冰袋运输。-15~-25℃保存,有效期2年;经常使用可置于4℃,有效期三个月;建议分装保存,避免反复冻融!

FAQ

Q:该产品可以直接使用吗?

A:当从-20℃拿出来后,应将本产品于室温融化后,轻柔混匀,使沉淀充分溶解。

Q:本品可作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准吗?

A:不可以。因为本产品含 SDS,蛋白已变性。

Q:本品如何储存?

A:-20℃保存,经常使用可置于 4℃,建议分装保存,避免反复冻融!

Q:为什么该产品在跑胶的时候出现了不同程度的偏移情况?

A:预染蛋白Marker由于和染料结合,在不同电泳体系中位置是偏移的,都是仅供参考。 因为染料和蛋白结合后,一般都会比本来蛋白跑得更快一些的 ,我们和非预染Marker标定过的。比如有些厂家的180 kDa条带在Bis-Tris体系中的实际位置为140 kDa,而我们的180 kDa条带在Bis-Tris体系中的实际位置可达175 kDa,证明我们的偏移更小一些。参考图如下:

Q:Marker每条带的蛋白浓度是?

A:5微升Marker每条带平均蛋白含量约为2.5 ug

Q:此Marker可以显影吗?

A:理论来说Marker没有抗体结合位点,不会被显影,但是如果和目的蛋白有相似的结合位点会被抗体识别到,进而被显影。赛默飞也有对Marker显影的相关解释。这种可能性无法避免。

Q:预染蛋白Marker电泳后清晰,但是转膜后颜色变淡?

A:通常情况下,转膜后预染marker条带会更鲜亮,如果颜色变淡,可能有几种情况:

 1)转印不完全

 操作不当,比如,转膜没有加冰袋,温度过高;胶和滤纸没夹紧。

 转膜条件不适合,转膜时间过长可能透膜,转膜时间过短,蛋白可能残留在胶内。

 膜没有充分活化,甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜,转移到滤纸上;未活化可能也可能导致膜吸附蛋白能力不强。

 膜孔径不适合,建议小分子蛋白使用0.22 um膜。

 2)转印正常,可能使用了特殊的转膜缓冲液,建议使用通用转膜缓冲液,或品质有保障的商用转膜缓冲液如翌圣快速转膜液。另外转膜液均不需要加SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。

Q:预染蛋白Marker电泳后清晰,但是洗膜后颜色变淡?

A:可能使用了比较特殊的缓冲液或者洗涤强度过强。建议使用通用缓冲液,或品质有保障的商用缓冲液,适当洗涤。较小孔径的膜可以在封闭和洗涤过程中更好地保留蛋白质。

COA
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