货号 |
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名称 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(即用型) |
Bradford蛋白浓度测定试剂盒 |
吸收波长 |
562 nm |
595 nm |
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原理 |
基于双缩脲反应,即在碱性环境下蛋白质将Cu2+还原成Cu+,产生一种紫蓝色复合物, 在562 nm处有高的吸光值,该反应产物的量与蛋白质浓度成正比。 |
Bradford染液(考马斯亮蓝G-250染料)与蛋白结合, 使染料的最大吸收峰从A456变为A595, 且测定的吸光值与蛋白浓度成正比 |
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检测灵敏度 |
最小检测蛋白量可达0.2 μg,检测浓度下 限达到10 μg/mL |
1~5 μg |
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时间 |
中速10-20 min |
快速5-15 min |
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优点 |
兼容去污剂和变性剂,变异低 |
在20201ES的基础上提供即用型标准品, 省去繁琐的稀释步骤。 |
兼容还原剂,快速 |
缺点 |
低或不兼容还原剂,需手动稀释标准品 |
低或不兼容还原剂 |
低兼容去污剂 |
同时翌圣额外提供浓度为2 mg/mL的BSA标准品(Cat# 20204ES)
提醒:用RIPA裂解液(Cat#20101ES/20114ES/20115ES/20118ES/20119ES/20200ES)裂解得到的蛋白样品,由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定其蛋白浓度。可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒(Cat#20201ES/20200ES)测定其蛋白浓度。
货号 |
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名称 |
考马斯亮蓝R250 |
考马斯亮蓝G250 |
考马斯亮蓝快速染色液(无需加热) |
考马斯亮蓝快速染色液(8分钟) |
蛋白质银染试剂盒 |
原理 |
通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。 蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。 |
银离子在碱性 pH 环境下被还原成金属银, 沉淀在蛋白质的表面上显色。 |
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应用 |
电泳蛋白染色 |
蛋白质含量测定 |
变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色 |
变性或非变性蛋白电泳的凝胶染色 及蛋白质谱分析 |
检测聚丙烯酰胺凝胶和 琼脂糖凝胶中的微量蛋白质 |
优点 |
染色灵敏度比氨基黑高5倍, 可达0.1 µg蛋白。 |
条带快速显色, 且背景颜色很浅不需要做褪色处理。 操作快速、方便。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分, 灵敏度高,无需加热。 |
不含甲醇或乙酸等刺激成分, 8-10分钟即可完成PAGE胶上蛋白染色, 无需脱色。 |
检测灵敏度更高, 可检测到10-100 ng蛋白质, 比考马斯亮蓝染色法灵敏100多倍 |
缺点 |
R250染色后需要脱色(有机试剂), 才能进行蛋白条带的观察。 |
灵敏度低,检测下限为0.5 µg。 |
染色时间约30 min-1 h, 需要脱色(蒸馏水20-40 min) |
染色过程中必须加热 |
操作较繁琐 |