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产品简介
人前蛋白转化酶9 (PCSK9)又称NARC1和PC9，属于肽酶S8家族。PCSK9在几种组织中表达和分泌，但主要在肝、小肠和肾中表达和分泌。可能与皮质神经元的分化有关，可能在胆固醇稳态中起作用。PCSK9是LDL受体和血浆胆固醇浓度的调节因子。
翌圣Human Proprotein Convertase 9/PCSK9 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人前蛋白转化酶9(Human Proprotein Convertase 9/PCSK9)。特异性抗人前蛋白转化酶9抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人前蛋白转化酶9与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人前蛋白转化酶9的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97045ES48 / 97045ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
125-8000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测时长 |
4小时35分钟 |
|
灵敏度 |
5.4 pg/mL |
|
稀释线性 |
75.3 - 125.0% |
|
回收率 |
70.0 - 126.7% |
|
板内差 |
4.9% |
|
板间差 |
5.5% |
实验数据
一、标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
8000.0 |
2.865 |
2.874 |
2.870 |
2.824 |
|
4000.0 |
1.926 |
1.987 |
1.956 |
1.911 |
|
2000.0 |
0.994 |
1.057 |
1.026 |
0.980 |
|
1000.0 |
0.594 |
0.582 |
0.588 |
0.543 |
|
500.0 |
0.264 |
0.251 |
0.258 |
0.212 |
|
250.0 |
0.169 |
0.154 |
0.162 |
0.116 |
|
125.0 |
0.102 |
0.117 |
0.110 |
0.064 |
|
0 |
0.042 |
0.049 |
0.046 |
/ |
- 灵敏度检测
人前蛋白转化酶9的最低检测限为5.4 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
2783.9 |
687.8 |
181.9 |
2774.4 |
695.5 |
187.3 |
|
标准差 |
125.01 |
34.19 |
9.70 |
117.00 |
34.57 |
13.56 |
|
变异系数（%） |
4.5 |
5.0 |
5.3 |
4.2 |
5.0 |
7.2 |
- 回收率检测
通过不同水平的人前蛋白转化酶9添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
93.8 |
71.9-126.7 |
|
血浆 |
82.7 |
70.0-93.7 |
|
细胞培养上清 |
83.6 |
71.2-106.9 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
98.3 |
94.2-104.1 |
|
1:04 |
94.9 |
89.2-99.6 |
|
1:08 |
93.5 |
85.9-99.8 |
|
1:16 |
84.5 |
75.3-104.1 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
106.5 |
97.6-112.8 |
|
1:04 |
106.9 |
95.3-112.8 |
|
1:08 |
106.5 |
99.4-111.5 |
|
1:16 |
92.2 |
79.1-114.4 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
100.0 |
97.9-102.5 |
|
1:04 |
107.6 |
100.9-112.6 |
|
1:08 |
110.3 |
103.1-116.0 |
|
1:16 |
112.0 |
94.3-125.0 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
172.8 |
81.2-258.1 |
|
血浆 |
10 |
149.4 |
71.2-271.4 |
|
细胞培养上清 |
10 |
0.03 |
n.d.-0.06 |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得125 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人前蛋白转化酶9。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
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LDLR |
PCSK9 |
|
PCSK1 |
|
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PCSK3 (Furin) |
|
|
PCSK7 |
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检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver. CN20241024
