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人B细胞成熟抗原 (Human BCMA / TNFRSF 17)是TNF受体超家族(TNFRSF17)的成员。BCMA在免疫器官和成熟b细胞系中均有表达。虽然在细胞表面观察到一些BCMA表达，但BCMA似乎定位于高尔基体。BCMA与APRIL或BAFF结合后可刺激外周血B细胞产生IgM，并提高培养的B细胞的存活率。成熟的人BCMA和小鼠BCMA有86%的氨基酸序列同源性。
翌圣Human BCMA / TNFRSF 17 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人B细胞成熟抗原(Human BCMA / TNFRSF 17)。特异性抗人B细胞成熟抗原抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人B细胞成熟抗原与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人B细胞成熟抗原的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长（参考波长570 - 630 nm）测定吸光度值。
产品信息
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货号 |
97004ES48 / 97004ES96 |
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规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
15.6-1000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测时长 |
3小时20分钟 |
|
灵敏度 |
0.94 pg/mL |
|
稀释线性 |
73.0 - 122.1% |
|
回收率 |
72.0 - 112.2% |
|
板内差 |
7.2% |
|
板间差 |
9.5% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
1000 |
3.359 |
3.281 |
3.320 |
3.293 |
|
500 |
1.837 |
1.825 |
1.831 |
1.804 |
|
250 |
0.821 |
0.869 |
0.845 |
0.818 |
|
125 |
0.415 |
0.442 |
0.428 |
0.402 |
|
62.5 |
0.221 |
0.211 |
0.216 |
0.189 |
|
31.3 |
0.118 |
0.121 |
0.119 |
0.093 |
|
15.6 |
0.080 |
0.076 |
0.078 |
0.051 |
|
0 |
0.028 |
0.025 |
0.027 |
/ |
- 灵敏度检测
人BCMA的最低检测限为0.94 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定16次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
16 |
16 |
16 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
789.8 |
136.6 |
37.2 |
810.2 |
173.4 |
46.2 |
|
标准差 |
53.25 |
12.88 |
2.04 |
71.81 |
16.20 |
4.72 |
|
变异系数（%） |
6.7 |
9.4 |
5.5 |
8.9 |
9.3 |
10.2 |
- 回收率检测
通过不同水平的BCMA添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
88.7 |
72.0-102.8 |
|
血浆 |
82.1 |
76.2-91.7 |
|
细胞培养上清 |
95.8 |
80.1-112.2 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
108.8 |
96.1-122.1 |
|
1:04 |
102.7 |
88.5-114.0 |
|
1:08 |
98.2 |
88.3-109.6 |
|
1:16 |
99.3 |
87.7-116.8 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
113.0 |
107.5-121.9 |
|
1:04 |
95.6 |
93.4-99.3 |
|
1:08 |
89.7 |
84.8-93.1 |
|
1:16 |
82.6 |
73.3-88.9 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
90.4 |
88.2-92.3 |
|
1:04 |
81.9 |
75.7-85.6 |
|
1:08 |
79.4 |
76.9-81.8 |
|
1:16 |
78.5 |
73.0-84.7 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（ng/mL） |
样本值（ng/mL） |
|
血清 |
10 |
17.8 |
11.7-24.1 |
|
血浆 |
10 |
12.8 |
6.3-23.5 |
|
细胞培养上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.6 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人BCMA，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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TACI/Fc Chimera |
BCMA/Fc Chimera |
检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
||
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
|
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver. CN20231026
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