I 型胶原蛋白（Pro-Collagen I alpha 1）是皮肤、骨骼和肌腱等结缔组织中含量最丰富的结构蛋白。它是一种合成的前胶原分子，其特征为300 nm的三重螺旋结构域，两侧是球状的N端和c端前肽。三螺旋结构域包含Gly-Xaa-Yaa三联体，其中Xaa和Yaa分别是脯氨酸和羟脯氨酸。前胶原蛋白N和C蛋白酶活性去除非螺旋前肽，因此成熟的三螺旋可以自组装成胶原原纤维，为组织提供拉伸强度。

翌圣Human Pro-Collagen I alpha 1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的人Ⅰ型胶原蛋白(Human Pro-Collagen I alpha 1)。特异性抗人Ⅰ型胶原蛋白抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人Ⅰ型胶原蛋白与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体（生物素标记）孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(HRP标记链霉亲和素)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人Ⅰ型胶原蛋白的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97044ES48 / 97044ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	23.4-1500 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4小时40分钟
灵敏度	10.2 pg/mL
稀释线性	80.9 - 118.0%
回收率	74.4 - 121.1%
板内差	6.3%
板间差	6.8%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

2. 灵敏度检测

Human Pro-Collagen I alpha 1的最低检测限为10.2 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定16次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	16	16	16	24	24	24
平均值	649.1	152.6	40.1	684.6	164.6	42.8
标准差	34.74	8.53	3.14	42.16	11.69	3.08
变异系数（%）	5.4	5.6	7.8	6.2	7.1	7.2

4. 回收率检测

 通过不同水平的人Ⅰ型胶原蛋白添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	87.4	74.4-121.1
血浆	88.3	74.4-114.4
细胞培养上清	106.5	92.2-118.9

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	96.8	89.3-102.2
1:04	100.0	93.9-106.1
1:08	99.7	92.7-105.6
1:16	94.7	80.9-102.6

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	108.3	101.3-116.1
1:04	107.2	101.9-114.7
1:08	105.9	99.5-113.1
1:16	104.7	91.1-118.0

 

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	99.1	91.1-107.1
1:04	92.0	87.4-96.6
1:08	88.4	85.0-91.8
1:16	84.6	79.6-89.5

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	10	112.8	30.7-260.1
血浆	10	203.3	54.8-1088.2
细胞培养上清	10	0.02	n.d.-0.04

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得23.4 pg/mL

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人Ⅰ型胶原蛋白，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:
BMP-1	COL2A1
COL-13A1	COL-3A1
COL-15A1	COL-4A1
COL-18A1	MFAP-4
COL-23A1	MRC-2
COL-25A1