人血管生成素类似物4（Human Angiopoietin-like 4）是由肝脏及脂肪组织分泌的分子量为55 kDa的糖蛋白，它与血管生成素的结构有关。该分子N端含有卷曲螺旋结构域，C端为纤维蛋白原样结构域，可在体内直接水解。成熟的人血管生成素类似物4与人血管生成素类似物1、2、3、5、6、7的氨基酸序列同源性为26% - 30%，与小鼠和大鼠的氨基酸序列同源性为75%。N端的卷曲螺旋结构域未被糖基化，能够形成二硫键，该结构域可直接抑制脂蛋白脂肪酶的活性，从而提高体内循环的甘油三酯水平。N端结构域的功能为血管生成抑制剂，而C端结构域通过调节细胞粘附提高角质细胞的迁移及创伤修复，除此之外，人血管生成素类似物4还可提高造血干细胞及间充质干细胞的存活能力。

翌圣Human Angiopoietin-like 4 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人血管生成素类似物4(Human Angiopoietin-like 4)。特异性抗人血管生成素类似物4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人血管生成素类似物4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人血管生成素类似物4的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号	97002ES48 / 97002ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	0.63-40 ng/mL
检测方法	双抗夹心法
检测物种	人
检测时长	5小时
灵敏度	0.056 ng/mL
稀释线性	76.1 - 122.0%
回收率	83.7 - 108.3%
板内差	3.5%
板间差	4.5%

 

实验数据

1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

2. 灵敏度检测

人血管生成素类似物4的最低检测限为0.056 ng/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

3. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
	20	20	20	36	36	36
平均值	1.1	4.8	20.0	1.2	4.9	20.3
标准差	0.06	0.11	0.51	0.08	0.17	0.65
变异系数（%）	5.5	2.3	2.5	6.8	3.5	3.2

4. 回收率检测

  通过不同水平的人促血管生成素配体4添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	100.2	96.2-108.3
血浆	91.3	83.7-102.1

5. 稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	101.8	101.4-102.6
1:04	105.3	102.4-109.3
1:08	100.2	96.5-107.3
1:16	102.1	88.2-122.0

 

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	93.8	89.6-98.7
1:04	95.7	89.3-98.6
1:08	91.2	84.5-97.5
1:16	81.5	76.1-85.0

6. 样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（ng/mL）	样本值（ng/mL）
血清	10	120.5	77.5-202.3
EDTA血浆	10	175.4	47.2-739.4
枸橼酸钠血浆	10	106.2	46.1-330.7

 

7. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人血管生成素类似物4。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Ang-1

Ang-2

ANGPTL3

ANGPTL4

Tie-2/Fc Chimera