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产品简介
人血清白蛋白 (Human Serum Albumin)，简称HSA，由580个氨基酸残基单链组成，约占血液中总蛋白的60%。它主要由肝脏产生，对维持胶体渗透压极其重要，还保持了血管室和血管外组织之间的流体平衡。同时作为一种运输蛋白，携带脂肪酸、胆红素以及各种药物和激素。血清白蛋白升高常见于浓缩脱水、大量出汗。降低则见于多种疾病，比如肝炎、肾病、营养不良等。
翌圣Human Serum Albumin (HSA) ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人血清白蛋白(Human Serum Albumin)。特异性抗人血清白蛋白抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人血清白蛋白与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人血清白蛋白的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
97048ES48 / 97048ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
3.13-200 ng/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
人 |
|
检测时长 |
4小时 |
|
灵敏度 |
0.2 ng/mL |
|
稀释线性 |
81 - 126% |
|
回收率 |
85 - 118% |
|
板内差 |
7.9% |
|
板间差 |
8.3% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（ng/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
200 |
2.189 |
2.201 |
2.195 |
2.107 |
|
100 |
1.306 |
1.393 |
1.350 |
1.262 |
|
50 |
0.776 |
0.843 |
0.810 |
0.722 |
|
25 |
0.429 |
0.430 |
0.430 |
0.342 |
|
12.5 |
0.273 |
0.257 |
0.265 |
0.177 |
|
6.25 |
0.183 |
0.192 |
0.187 |
0.099 |
|
3.13 |
0.143 |
0.152 |
0.147 |
0.059 |
|
0 |
0.083 |
0.092 |
0.088 |
/ |
- 灵敏度检测
人血清白蛋白的最低检测限为0.2 ng/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
|
|
平均值 |
90 |
21.3 |
2.22 |
90.8 |
22.03 |
2.3 |
|
标准差 |
4.6 |
2.3 |
0.2 |
6.37 |
1.8 |
0.22 |
|
变异系数（%） |
5.2 |
10.9 |
7.5 |
7.0 |
8.2 |
9.6 |
- 回收率检测
通过不同水平的人血清白蛋白添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
104.5 |
84.5-117.7 |
|
血浆 |
99.2 |
88.0-110.0 |
|
细胞培养上清 |
100.5 |
91.8-111.0 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
97.7 |
87.8-100.4 |
|
1:04 |
96.9 |
82.8-104.4 |
|
1:08 |
99.2 |
82.4-109.2 |
|
1:16 |
104.5 |
83.6-125.7 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
100.2 |
82.2-115.2 |
|
1:04 |
93.8 |
83.2-108.6 |
|
1:08 |
90.8 |
80.8-111.2 |
|
1:16 |
100.1 |
82.0-116.9 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
103.8 |
102.3-105.9 |
|
1:04 |
98.0 |
93.7-100.5 |
|
1:08 |
99.8 |
91.8-111.0 |
|
1:16 |
116.0 |
89.1-124. |
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（mg/mL） |
样本值（mg/mL） |
|
血清 |
6 |
22.6 |
9.7-58.2 |
|
血浆 |
6 |
20.7 |
11.1-36.6 |
|
细胞培养上清 |
3 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得3.13 ng/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人血清白蛋白。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant human: |
Natural proteins: |
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a-Fetoprotein |
Human Pre-Albumin |
|
Parvalbumin |
Bovine Serum Albumin |
|
|
Mouse Serum Albumin |
检测简图
疑问解答
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问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
||
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显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
