PerfCell Tryzyme™ Express酶是一种非动物来源的重组胰蛋白酶,能裂解赖氨酸和精氨酸C端肽键,可直接替代胰蛋白酶,适用于解离各类贴壁哺乳动物细胞,包括 CHO、HEK 293、A529等细胞。产品纯度高,其特异性比天然胰蛋白酶制剂更强,对细胞损害低。产品溶于DPBS/ 1mM EDTA中,室温稳定,使用方便。
运输和保存方法
室温保存,避光。有效期24个月。
注意事项
1)单用稀释剂即可使 PerfCell Tryzyme™ Express酶失活,无需使用胰蛋白酶抑制剂(如 FBS)。
2)PerfCell Tryzyme™ Express酶在 2°C至8°C和-20°C至-5°C保存时也很稳定,可避光长达24个月。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4)本产品仅作科研用途!
操作方法
PerfCell Tryzyme™ Express酶被设计为现有方案中胰蛋白酶的直接替代品。
1.使用前预热PerfCell Tryzyme™ Express酶和完全生长培养基至37°C。尽量减少停留时间。
【注意】:PerfCell Tryzyme™ Express酶可在室温环境下用于多种类型的细胞。
2.吸取用过的培养基并丢弃。
3.用5 mL不含钙和镁的磷酸缓冲盐水(DPBS)冲洗单层细胞,吸取和丢弃。
4.向培养瓶中加入适量的PerfCell Tryzyme™ Express酶(如75 cm2培养瓶加入5 mL)。用PerfCell Tryzyme™ Express酶确保单层细胞被完全覆盖。
5.在37°C孵育直到细胞分离。用倒置显微镜观察细胞单层,以确保细胞完全脱离培养瓶表面。如有必要,轻敲培养瓶以去除细胞。
6.向培养瓶中加入5-10 mL预热过的完全培养基。向各个方向倾斜培养瓶以彻底冲洗培养瓶。细胞悬浮液加到15 mL离心管中。
7.100 g离心5-10 min。
8.丢弃上清,用2-5 mL预热过的完全培养基重悬细胞。
HB230801