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Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴细胞分离液1.077(人外周血淋巴细胞)
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产品介绍

淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium, LSM)是一种滤膜除菌的即用型分离液,用于体外分离人外周血淋巴细胞,也可以从其他组织中分离淋巴细胞,包括脐带血和骨髓细胞等。

每100 mL包含6.2 g聚蔗糖和9.4 g泛影酸钠。20℃下密度是1.0770-1.0800 g/mL。


密度梯度介质产品选购指南:

产品货号60378ES60350ES40502ES40501ES40515ES
产品名称氯化铯(超纯级)蔗糖Ficoll 400Percoll60% W/V 碘克沙醇溶液
主要组成氯化铯蔗糖蔗糖与环氧氯丙烷的聚合物常与泛影酸钠/甲泛影钠复配为淋巴细胞分离液涂有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的胶体二氧化硅碘克沙醇
离子性离子型非离子型非离子型非离子型非离子型
特性水溶性大成本友好强亲水性可透析物质含量低温和无毒
高稳定性
常见下游分析(例如电泳实验)需去除残留
温和无毒
代谢惰性
仅在电镜观察前需去除残留碘克沙醇
渗透压优于蔗糖在有用密度下均等渗
粘度较低高,比同类蔗糖溶液更粘
细胞毒性
梯度类型连续/不连续均可连续/不连续均可连续/不连续均可不连续连续/不连续均可
适用场景适用于DNA和RNA分离适用于细胞器、病毒、外泌体、DNA/RNA分离等,不适用于细胞分离用于分离对离心沉淀敏感的细胞,以及用于分离密度相似但大小不同的细胞,PBMC/淋巴细胞分离首选淋巴细胞分离液同时,其还能作为半抗原载体和电解质稳定剂等通用性强,广泛用于分离细胞、亚细胞成分、膜囊泡、细菌及病毒等,也常用于分离和纯化植物原生质体、叶绿体、线粒体。适用性广泛,适用于细胞(包括敏感细胞)、细胞器、膜囊泡、病毒、死细胞等要求高分辨率、高活性、高回收性的分离场景。


产品特色

工作原理

用去纤维蛋白或肝素处理人血,以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30 min。离心过程中,由于差速迁移最终形成不同的细胞层。

红细胞和多形核粒细胞,它们通过梯度迁移至管底。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,最后进一步清洗去除血小板,LSM和血浆。

注意事项

【产品近期(24年底到25年初)会进行包装升级更换,产品工艺不变,如收到新旧包装,都属正常】

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

2)稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体;

3)为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。

4)本产品仅作科研用途!

应用案例

操作方法

(用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人体血液;对于其他物种或者其他组织的血液,需要对此程序做出一定的改进)

1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合。

2. 无菌条件转移3 mL LSM到15 mL离心管中。

3. 用2 mL生理盐水混合2 mL去纤维蛋白血液或肝素化血液。

4. 小心将稀释血液加入含有3 mL LSM(室温)的15 mL离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。不要将稀释血液混合入LSM中。

5. 室温下400×g离心15-30 min,离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞,同时可以在LSM上形成一层单核淋巴细胞,如下图所示(分层情况从上到下依次为血浆层-单个核细胞层-LSM层-RBC颗粒)。

6. 吸出淋巴细胞层上方2-3 mm的血浆。

7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层,并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中,室温(18-25°C)离心10min,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围,例如160-260×g(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比)。

8. 再用平衡盐缓冲液清洗细胞,最后取适当的培养基(实验者所用)重悬细胞。

存储条件

室温运输、15-30°C保存,有效期2年。

FAQ

Q: 1.077、1.084 指的什么?有什么区别?

A: 指的是密度,密度高分离效果好。

COA
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