Strep-Tag II为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1.06 kDa左右,不影响融合后蛋白质的结构和功能,因此无需去除该标签。其特异性高,单步纯化纯度高,纯化条件温和,蛋白两端均可融合等突出特点迅速得到了广泛应用。Twin Strep-Tag II是一个顺序排列的两个Strep-Tag II序列(通过内部氨基酸连接),该标签能够像Strep-Tag II一样进行温和、快速的纯化。
链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代)是最稳定的蛋白之一,其偶联至高度交联的 4%琼脂糖微球上,可用于各种表达系统,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中含有 Strep-Tag II 标签蛋白纯化,同时该树脂也可用于Twin Strep-Tag II 标签纯化。
翌圣Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF储存在20%乙醇中,凝胶和保护液的比例为1:1,我司产品规格为实际凝胶的体积。
翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南
基质 | 高度交联的4%琼脂糖凝胶 |
配体 | 链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代) |
粒径 | 45-165 µm |
载量 | 3-5 mg Twin Strep-Tag II 蛋白/mL 基质 |
最大流速 | 300 cm/h |
储存缓冲液 | 含20%乙醇的1×PBS |
冰袋运输。2~8℃保存,有效期2年。
Q:用脱硫生物素洗脱,除了用HABA再生以外,还可以用氢氧化钠再生吗?可以重复使用几次?
A:使用脱硫生物素作为洗脱液,用1 mM HABA或低浓度氢氧化钠(0.1 M)可再生10次左右。
Q:这个产品可以用D-生物素洗脱吗?
A: 可以用,但是用D-生物素洗脱后必须用高浓度氢氧化钠再生,重复使用时载量会明显变低。所以如果填料需要重复使用就必须用脱硫生物素洗脱。
Q:这个产品属于第几代?
A: 我们此款产品属于第二代。第三代填料的洗脱液可用D-生物素,能在低浓度生物素或者变性等特殊条件下结合Strep标签蛋白,再生方法可用氢氧化钠再生且重复使用效果较好。第三代产品是Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES) 。
Q:这个产品耐压多少?
A: 填料耐压0.3 MPa。
Q:如果我的Strep-Tag II 标签是位于我融合蛋白的中间位置可以用这个树脂吗?
A: 取决于标签的暴露情况
Q:如果用蛋白洗脱不下来,那怎么办?
A: 在洗脱液中加终浓度0.1%-0.5%Triton X-100,室温混合孵育30min。
Q:一个 beads上大概有多少个strep-tag II 的结合位点?我想知道这一个beads上能负载多少个蛋白?
A: 1 mL微球上的strep-tag II结合位点约为1.8×10^17个,1 mL填料中的微球颗粒数约为1×10^6。
Q:用HABA再生后填料变色并洗不白,如下图。
A: 这个是HABA和配体结合,可以平衡后直接上样,strep标签蛋白会将HABA竞争下来
Q:填料配基的分子量是多大?
A: 15 kDa