Strep-Tag II为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1.06 kDa左右,不影响融合后蛋白质的结构和功能,因此无需去除该标签。其特异性高,单步纯化纯度高,纯化条件温和,蛋白两端均可融合等突出特点迅速得到了广泛应用。Twin Strep-Tag II是一个顺序排列的两个Strep-Tag II序列(通过内部氨基酸连接),该标签能够像Strep-Tag II一样进行温和、快速的纯化。
翌圣目前可提供Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(Cat#20495ES)和Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES),产品区别请参考下表:
产品货号 | 20495ES | 20795ES |
产品名称 | Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂 | Strep(Ⅱ)Sep Plus Agarose Purification Resin 4FF Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版) |
基质 | 高度交联的4%琼脂糖凝胶 | 高度交联的4%琼脂糖凝胶 |
配体 | 链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代) | 链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(三代) |
与Strep II标签结合能力 | 3-5 mg Twin Strep-Tag II蛋白/mL 基质 | 8-10 mg Strep-Tag II 蛋白/mL 基质 |
与生物素结合能力 | 与生物素结合较牢固,样品中少量D-生物素就会影响Strep II 标签蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代)的结合效果。 | 与生物素的亲和力大幅削弱,样品中低浓度(50 μmol/L)的D-生物素不会影响 Strep II 标签蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(三代)的结合效果。 |
洗脱方面 | 使用脱硫生物素作为洗脱液,1 mM HABA或0.1 M NaOH再生前后载量变化较小。使用D-生物素作为洗脱液,需使用高浓度NaOH(1 M)再生,再生后载量只能达到初始载量的50%左右,对填料损害较大。 | 可以使用D-生物素进行洗脱,且使用后可采用 10~50 mM NaOH 进行再生,再生前后载量变化较小。 |
Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂对Strep II标签具有高度特异性,一般只需一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。可用于各种表达系统,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中含有 Strep-Tag II 标签蛋白纯化,同时该树脂也可用于Twin Strep-Tag II 标签纯化。
【重要提示】由于真核表达体系内有游离生物素,游离生物素会和Streptavidin的突变体(二代)结合,影响蛋白挂柱效果,故使用本品进行真核表达蛋白纯化时,需事先对样品进行透析换液。也可直接选择Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES),可以耐受样品中低浓度(50 μmol/L)的D-生物素。
翌圣Strep(Ⅱ)Sep Agarose Purification Resin 4FF储存在20%乙醇中,凝胶和保护液的比例为1:1,我司产品规格为实际凝胶的体积。
翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南
基质 | 高度交联的4%琼脂糖凝胶 |
配体 | 链霉亲和素(Streptavidin)的突变体(二代) |
粒径 | 45-165 µm |
载量 | 3-5 mg Twin Strep-Tag II 蛋白/mL 基质 |
最大流速 | 300 cm/h |
储存缓冲液 | 含20%乙醇的1×PBS |
冰袋运输。2~8℃保存,有效期2年。