DAPI染液(5mg/ml)DAPI Stain Solution(5mg/ml)

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产品描述

DAPI,也称DAPI dihydrochloride,是一种常用的核酸染料,可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合,产生比自身强20多倍的蓝色荧光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI也可对RNA进行染色,染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500 nm),其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA20%。

尽管DAPI不能通过活细胞膜,但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色体DNA。

DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术,因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域,其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

本产品为溶液,浓度为5 mg/mL。另外提供粉末形式的DAPI(Cat No. 40727ES10)供客户选购。
 

产品性质

中文名称(Chinese Synonym)

4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

英文名称(English Synonym)

4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride

CAS号(CAS NO.)

28718-90-3

分子式(Molecular Fomular)

C16H17Cl2N5·2HCl

分子量(Molecular Weight)

350.25

荧光光谱(Fluorescence Spectral)

DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm


运输与保存方法
冰袋运输,5 mg/mL的DAPI储存液于-20ºC避光保存,1年有效。

 

注意事项

1)DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4)低浓度的DAPI不容易穿透细胞膜。

5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

6)本产品仅作科研用途!
 

使用方法

1. 配制工作液:
用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10 μg/mL)。

2. 固定的细胞或组织染色:

对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI 染色。

a) 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。

b) 对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。

c) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。

d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm,发射波长460 nm。

3. 活细胞或组织染色:

a) 细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。 

b) 在37℃培养细胞 10~20 分钟。

c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm,发射波长460 nm。

 

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