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细胞示踪荧光探针

 

 

一、线粒体探针

线粒体是一种存在于大多数真核细胞中的由两层膜包被的细胞器,直径在0.5-10微米左右。线粒体有“细胞动力工厂”之称,是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,主要为细胞活动提供能量。另外,线粒体还承担了许多其他生理功能,如调节膜电位并导致细胞凋亡。线粒体膜通透性增加也能使诱导凋亡因子(AIF)等分子释放进入细胞质基质,破坏细胞结构。

1.MitoTracker® 线粒体示踪

MitoTracker系列探针专用于检测活细胞线粒体,具有细胞通透性,易于在有活性的线粒体中积累。一旦线粒体被标记,细胞就能用甲醛固定剂固定,一些MitoTracker探针能在固定之后保留在线粒体内。尽管传统的线粒体探针如Rhodamine 123也很容易标记线粒体,但是一旦线粒体的膜电位损失,它们就很容易被洗掉。

MitoTracker系列探针具有多种颜色,适合于多色标记实验。MitoTracker Green FM 是线粒体绿色荧光染料,这种染料定位于线粒体的能力看起来不受线粒体膜电位影响。 该染料可以对活细胞进行染色,但是乙醛固定后不能稳定保存。 MitoTracker Red CMXRos 是一种红色荧光染料,用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。MitoTracker Red CM-H2XRos 是 MitoTracker Red 的非荧光还原态,在氧化时才会发出红色荧光。该染料也可以对活细胞线粒体进行染色并且其积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。但是,该染料在体外发生氧化反应,就不能检测到荧光,所以要求保存在惰性(如氮气)气体中。MitoTracker® Deep Red FM 是一种远红荧光染料(Ex/Em约为 640/662 nm),用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。 乙醛固定后,该染料可稳定保存。

 

Yeasen货号

产品名称

Ex/Em(nm)

是否可以固定

规格

价格(元)

40740ES50

MitoTracker® Red CM-H2XRos

线粒体红色荧光探针

579/599

Yes

50µg

425.00

40741ES50

MitoTracker® Red CMXRos

线粒体红色荧光探针

579/599

Yes

50µg

425.00

40742ES50

MitoTracker® Green FM

线粒体绿色荧光探针

490/516

No

50µg

425.00

40743ES50

MitoTracker® Deep Red FM

线粒体深红色荧光探针

644/665

Yes

50µg

425.00

 

2.早期凋亡检测(线粒体膜电位检测探针)

在细胞凋亡的过程中往往伴随着线粒体跨膜电位的破坏,这被广泛认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子荧光染料如 Rhodamine 123、JC-1、JC-10等可结合到线粒体基质,其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。

JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm 的理想荧光探针,表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);而凋亡细胞,线粒体跨膜电位去极化,JC-1从线粒体内释放,浓度降低,逆转为发射绿色荧光的单体形式。因此颜色的变化非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。线粒体的去极化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。JC-1的流式检测是比较常见的一种方法。

Yeasen货号

产品名称

规格

价格(元)

40705ES03

JC-1 线粒体膜电位荧光探针

1mg

615.00

40705ES08

JC-1 线粒体膜电位荧光探针

5mg

2450.00

40706ES60

JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

JC-1线粒体膜电位检测试剂盒

100T

800.00

40707ES03

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

1mg

680.00

40707ES08

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

5mg

2763.00

40752ES60

JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit  JC-10线粒体膜电位检测试剂盒

100T

1600.00

40333ES76

CCCP (50 mM) 细胞凋亡诱导剂CCCP(50 mM)

 100ul 

          318.00

 

3.线粒体与活性氧检测

活性氧,Reactive Oxygen Species(ROS)包括3种含氧的自由基:羟自由基(·OH),超氧阴离子(O2·),氢过氧自由基(HO2);2种过氧化物:过氧化氢(H2O2)和过氧化脂质(ROOH);以及一种含氮的氧化物(NO)。

活性氧(ROS)在通路中的作用:

1)建立宿主自身防御系统,调节基因表达,促进细胞生长和分化,有利于干细胞增殖、神经保护等;

2)浓度过高会引起细胞凋亡,细胞损伤,脂质和蛋白过氧化等。

活性氧(ROS)的主要来源:

1)线粒体的氧化呼吸链;2)NADP氧化酶;3)细胞色素P-450。

验证ROS是否来自线粒体的方法?

当线粒体产生过量ROS的时候,必然导致线粒体本身的正常结构和物理状态发生变化,常见的比如线粒体膜完整性和膜电位的缺失。

(一)Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit 活性氧(ROS)检测试剂盒

活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一种基于荧光染料DCFH-DA(2,7-Dichlorodi -hydrofluorescein diacetate)的荧光强度变化,定量检测细胞内活性氧水平的常用方法。

DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜。进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不会通透细胞膜,因此探针很容易被积聚在细胞内。细胞内的活性氧能够氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。绿色荧光强度与活性氧的水平成正比。在最大激发波长480nm,最大发射波长525nm处,使用荧光显微镜,流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等检测荧光信号,并根据阳性对照Rosup的荧光信号来分析活性氧的真正水平。

Yeasen货号

产品名称

规格

价格(元)

50101ES01

Reactive Oxygen Species (ROS) Assay Kit

活性氧(ROS)检测试剂盒

1 kit (100 ~ 500 tests)

965.00

 

 

 

(二)CellROX Orange Reagent, for Live Cell Oxidative Stress Detection氧化应激检测橙色探针(活细胞)

CellROX Orange氧化应激试剂是能够可靠地检测活细胞中的ROS的荧光探针。细胞渗透性CellROX试剂一旦氧化,即可发出明亮荧光。CellROX Orange试剂荧光信号主要位于胞质。

采用传统的荧光显微镜、高内涵成像和分析、微孔板荧光光度计或流式细胞仪测量产生的荧光。染色操作过程极为简单,可将试剂直接加入完全培养基或缓冲液中的细胞。与传统的ROS检测染料相比,CellROX试剂的光稳定性极强。

产品特点

A适用于荧光成像、荧光酶标仪、流式细胞术和高内涵筛选;

B对光漂白作用具有较强的抵抗力;

C多重分析:可与不同荧光素染料相兼容;

D功能多样:适用于活细胞成像或固定样本。

Yeasen货号

产品名称

规格

价格(元)

50103ES50

CellROX Orange Reagent, for Live Cell Oxidative Stress Detection

氧化应激检测橙色探针(活细胞)

1×50μl

2985.00

 

(三)MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 线粒体超氧化物红色荧光探针

MitoSOX Red是活细胞中的一种特异性靶向线粒体的新型荧光染料。 MitoSOX Red被超氧化物而非其他活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化,氧化产物结合核酸后产生大量红色荧光,线粒体产生的超氧化物可在荧光显微镜下显示。MitoSOX Red可用于在对活细胞线粒体释放的超氧化物的直接检测中区别分离线粒体中的人为误差。

产品特点

A容易为超氧化物而不是其他的ROS、RNS生成系统氧化;

B吸收波长⁄发射波长最大值: ~510⁄580 nm;

C用于活细胞成像;

D快速选择性靶向线粒体;

E快速简便检测活细胞线粒体中的超氧化物。

Yeasen货号

产品名称

规格

价格(元)

50301ES76

Catechin hydrate (抗氧化剂)

500mg

156.00

50302ES76

Lipoic acid (抗氧化剂)

500mg

195.00

50303ES05

NAC (N-乙酰-L-半胱氨酸) (抗氧化剂)

2g

86.00

50304ES05

Tocopherol (抗氧化剂)

2g

68.00

50305ES70

Catalase(抗氧化酶)

200mg

182.00

40778ES50

MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator

线粒体超氧化物红色荧光探针

50 µg

 695.00

 

4.线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeablity transition pore,mPTP)分析

线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeablity transition pore,mPTP),又称线粒体巨型通道(magachannel),是存在于线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道,由多种蛋白质复合组成。线粒体通透性转换孔 (mPTP)可能参与了细胞死亡过程中线粒体成分的释放。 相对于仅基于线粒体膜电位的分析来说,该分析试剂盒能更直接地检测线粒体通透性转换孔的开放。

Yeasen货号

产品名称

规格

价格(元)

40756ES60

Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)

线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析)

100T

3586.00

 

5.线粒体定位载体

线粒体定位载体用于研究重组蛋白在线粒体(mitochondria)的定位及功能的便利的工具。研究人员可以根据自己的研究目的选择相应的定位表达载体,再将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。 

阳性对照可以表达GFP,且同样定位在线粒体上。

细胞定位载体具有以下特点:

1)CMV强启动子启动蛋白的表达;

2)C端携带c-myc标签,可用anti-myc抗体检测;

3)BGH多腺苷酸化位点可以稳定mRNA;

4)f1原点单链正义链DNA f1 origin for single-stranded rescue of sense DNA

5)携带Neomycin抗性基因可用于哺乳动物细胞筛选;

6)Ampicillin抗性和pUC原点可用于E. coli中的筛选;

7)载体带的荧光标记可通过荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察;

8)应用于研究蛋白在微环境中的检测。

细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞中的具体存在位置,例如在细胞核( nucleus)内、细胞质( cytoplasm)内、线粒体(mitochondria)或内质网(endoplasmic reticulum)上。

  

 

 

二、LysoTracker和Lysosensor溶酶体探针

溶酶体为单层膜蛋白包围的内含一系列酸性水解酶的小体。溶酶体中含有多种酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等等,是物质代谢的场所。Lysotracker系列探针用于标记和追踪活细胞中的酸性细胞器,该系列探针对酸性细胞器具有很高的选择性,且标记效率高(纳摩尔浓度即可有效标记)。Lysotracker探针是细胞膜通透性的,一般聚集在球形的细胞器中。

LysoSensor系列探针可用于活细胞中溶酶体生物发生动力学研究,该探针是向酸性的探针,由于质子化作用聚集在酸性细胞器中。质子化也缓解了染料的荧光淬灭,使荧光强度增加。因此,LysoSensor探针在酸化的环境中表现出pH依赖的荧光强度增加,而LysoTracker的荧光则没有明显变化。LysoSensor™ Green DND-189的pKa值很低,处于酸性环境中才会发出荧光。LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160很特别,具有双激发和双发射峰,是pH依赖的。在酸性细胞器中,它主要发黄色荧光,而在弱酸性细胞器中,荧光则为蓝色。

注:探针标记细胞后,只能用荧光显微镜观察,而不能用流式或荧光酶标仪检测,因为在总细胞荧光中溶酶体荧光只占非常小的比例。

Yeasen货号

产品名称

Abs (nm)

Em (nm)

pKa

规格

价格(元)

40738ES50

LysoTracker Green DND-26

溶酶体绿色荧光探针

504

511

NA

50μl

425.00

40739ES50

LysoTracker Red DND-99

溶酶体红色荧光探针

577

590

NA

50μl

425.00

40767ES50

LysoSensor™ Green DND-189

溶酶体绿色荧光探针

443

505

5.2

50μl

425.00

40768ES50

LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 (PDMPO)

溶酶体黄/蓝色荧光探针

329, 384

440, 540

4.2

50μl

425.00

 

三、内质网探针

1.活细胞内质网探针

内质网是细胞中由膜围成的分支小管、小囊或扁平囊状结构连通而成的管道系统,可分为粗面内质网和滑面内质网两种。粗面内质网上附着有核糖体,是合成蛋白质的主要场所;滑面内质网则功能多样,比如在肝细胞中与解毒和糖代谢有关。ER-Tracker系列探针是细胞通透性的活细胞染料,是ER高度选择性的。ER-Tracker Blue-White DPX 内质网蓝色荧光探针,染色后可用醛类固定,但荧光信号会又明显损失【信号部分保留】。ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide) 内质网绿色荧光探针,染色后可用醛类固定,但荧光信号会又明显损失【信号部分保留】。ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)内质网红色荧光探针染色后可用醛类固定,但荧光信号会又明显损失【信号部分保留】。

Yeasen货号

产品名称

Ex/Em (nm)

Filter

规格

价格(元)

40761ES50

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging内质网蓝色荧光探针(活细胞)

374/430-640

DAPI or UV longpass

50µl

499.00

40763ES20

ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide), for live-cell imaging 

内质网绿色荧光探针(活细胞)

504/511

FITC

20µl (1mM)

1285.00

40764ES20

ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide), for live-cell imaging 

内质网红色荧光探针(活细胞)

587/615

TRITC

20µl (1mM)

1285.00

2.内质网定位载体

内质网定位载体用于研究重组蛋白在内质网(Endoplasmic reticulum)的定位及功能的便利的工具。研究人员可以根据自己的研究目的选择相应的定位表达载体,再将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。 

阳性对照可以表达GFP,且同样定位在内质网上。

 

四、高尔基体探针
 

高尔基复合体的功能主要是将由粗面内质网运来的蛋白类物质进行加工、浓缩、储存和运送,最后形成分泌泡排除。

1.活细胞高尔基体探针

Golgi-Tracker Green(BODIPY® FL C5-Ceramide)适用于活细胞高尔基体染色探针,不适用于固定细胞染色。

Golgi-Tracker red(BODIPY® TR C5-Ceramide) 适用于活细胞高尔基体染色探针,不适用于固定细胞染色。

五、细胞质膜探针——亲脂性膜探针

DiD,DiO,DiI和DiR染料是一类亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。进入细胞膜后,染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染料在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析,另外,DiI (DiIC18(3)) 也可用于内质网膜标记。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,自荧光背景低,特别适用于标记细胞和脂质体的体内追踪。

DiA为亲脂性氨基苯乙烯基染料,常用于神经元的示踪。DiA可与DiI双色标记神经细胞,是一种比DiO更好的示踪探针。

CellTracker CM-DiI为DiI 的衍生物,在DiI 中加入了具有中度巯基反应特性的氯甲基取代物,后者能与细胞内含巯基的肽和蛋白结合,使得CM-DiI 能够抵抗醛类的固定作用。CM-DiI 在细胞固定、破膜及石蜡包埋的整个过程中均能很好的保留在细胞内,因此较DiI 更适于固定后标本的长期示踪。可与GFP一起用于双标实验。

货号

产品名称

Ex/Em (nm)

规格

价格(元)

40725ES10

DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

484/501

10mg

488.00

40725ES25

DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

484/501

25mg

988.00

40726ES10

DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针

550/567

10mg

398.00

40772ES25

DiIC16(3) perchlorate 细胞膜橙红色荧光探针

550/567

25mg

988.00

40757ES25

DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针

748/780

25mg

988.00

40758ES25

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

644/663

25mg

988.00

40718ES50

Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI (红色)

553/570

1×50μg

425.00

40718ES60

Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI (红色)

553/570

2×50μg

815.00

40718ES72

Celltracker CM-DiI 活细胞示踪剂CM-DiI (红色)

553/570

5×50μg

1545.00

 

六、细胞质探针

细胞质由细胞质基质、内膜系统、细胞骨架和包涵物组成,在生活状态下为透明胶状物,是生命活动主要场所。

1.活细胞探针

Fluorescein diacetate即FDA,中文名为二乙酸荧光素,是一种具细胞膜渗透性的酯酶底物,常用作细胞活力分析。不仅可以测定酯酶活力,因FDA需要在酯酶的催化下才能活化产生绿色荧光;而且还可用来鉴定细胞膜完整性,只有在完整膜内才能维持荧光。也可用于流式分析。

钙黄绿素(Calcein, AM)是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,由于在Calcein(钙黄绿素)的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。进入细胞后,Calcein, AM被细胞内的酯酶剪切形成Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF, AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM细胞毒性极低,是适合用于活细胞染色的荧光探针,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。Calcein, AM是用于检测细胞粘附、趋化性和多药抗药性的较好的探针。

CellTracker系列产品(包括CellTracker Orange, CellTracker Green, CellTracker Deep Red等)是一类经典的荧光示踪染料。这些染料含有氯甲基集团,体外实验显示参与GST反应,能与硫醇相互作用,在大多数细胞中,谷胱甘肽的表达水平都比较高,并且谷胱甘肽转移酶也随处可见,因此这种染料添加到细胞培养物中,经过洗涤进入细胞,能在细胞中存留多代,并不会转移到该群的其他细胞中去(仅有很小可能会通过缝隙连接转移)。这种探针在荧光染料的细胞存留能力上实现了一个突破,用于移植细胞和组织的长时间示踪非常理想。

2.细胞分化和增殖示踪探针

CFDA, SE具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),后者可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。

CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。

CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。

另外,还可提供CFDA,SE细胞增殖与示踪检测试剂盒,试剂盒中包含配制CFDA,SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液,简化了实验前期准备工作。

 

货号

产品名称

Ex/Em (nm)

规格

价格(元)

40714ES76

CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit

细胞增殖与示踪检测试剂盒

494/521

500T

398.00

40714ES80

CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit

细胞增殖与示踪检测试剂盒

494/521

1000T

728.00

40715ES25

CFDA, SE 细胞增殖示踪荧光探针

494/521

25mg

1599.00

40716ES25

CDCFDA, SE (细胞增殖示踪荧光探针)

494/521

25mg

1900.00

40719ES50

Calcein, AM, Ultrapure Grade 钙黄绿素,超纯级

490/515

1×50μg

199.00

40719ES60

Calcein, AM, Ultrapure Grade 钙黄绿素,超纯级

490/515

2×50μg

369.00

40720ES03

Fluorescein diacetate(FDA) 二乙酸荧光素

490/526

1g

145.00

40720ES08

Fluorescein diacetate(FDA) 二乙酸荧光素

490/526

5g

380.00

40721ES50

CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate) 活细胞示踪剂CMFDA(绿色)

492⁄517

1×50μg

575.00

40721ES60

CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate) 活细胞示踪剂CMFDA(绿色)

492⁄517

2×50μg

895.00

40721ES72

CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate) 活细胞示踪剂CMFDA(绿色)

492⁄517

5×50μg

1565.00

 

七、细胞骨架探针

1.微丝(F-actin)探针

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin。可与多种荧光染料偶联,如四甲基罗丹明 (TRITC) 、FITC 、iFluor™ 488、iFluor™ 647、iFluor™ 555等,通过标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的丝状肌动蛋白,从而对其进行定性和定量分析。

该系列产品具有以下特点:

亲和力高:Kd= 20 nM;

特异性强:选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合;

优于抗体染色:不同于Actin抗体,鬼笔环肽无物种限制性,适用范围广;且几乎不存在非特异性区域,染色区和非染色区域对比性极其明显;

灵敏度高:纳摩尔浓度(nM)染色即可满足实验要求;

兼容性好,肌动蛋白活力不受影响:鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Da,标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持;

适用范围广:无物种差异性;同样适用于甲醛固定和打孔处理后的组织样本。

 

2.G-actin探针

Alexa Fluor® 488标记Deoxyribonuclease I选择性结合G-actin(球状),发明亮的绿色荧光,并可以检测固定细胞中未聚合的肌动蛋白(actin)。

货号

产品名称

荧光

规格

价格(元)

40733ES03

Amino-Phalloidin 氨基鬼笔环肽

/

1mg

6399.00

40734ES75*

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

红色

300T

1533.00

40734ES80

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

1mg

6456.00

40735ES75*

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

绿色

300T

766.00

40735ES80

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

1mg

645600

40736ES75

iFluor™ 488 phalloidin iFluor™ 488标记鬼笔环肽(绿色)

绿色

300T

2126.00

40737ES75

iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555标记鬼笔环肽(橘色)

橘色

300T

2126.00

40762ES75

iFluor™ 647 phalloidin iFluor™ 647标记鬼笔环肽(远红)

远红

300T

2126.00

 

3.微管 (microtubulin - polymerized tubulin)探针

Tubulin Tracker Green 是不带电的无荧光化合物,易于穿过活细胞的质膜。 一旦进入细胞,亲脂性封闭基团被非特异性的脂酶切割,得到绿色荧光的带电形式。主要用于对活细胞中多聚化的微管蛋白染色。

 

八、细胞核染色

1.常用的细胞核荧光探针

碘化丙啶(PI)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,是一种溴化乙啶的类似物,在嵌入双链DNA后释放红色荧光。不可透过完整细胞膜,但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。红色荧光(Ex=540nm,Em=608nm)。

DAPI,也称DAPI dihydrochloride,与双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂,它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。DAPI可以透过完整细胞膜对DNA染色。蓝色荧光(Ex=364nm,Em=454nm)。

7-氨基放线菌素(7-AAD)是一种细胞核荧光染料,嵌入双链DNA,不可透过完整细胞膜,随着细胞凋亡、细胞死亡过程,质膜对7-AAD的通透性逐渐增加。广泛用于FACS,荧光强度虽低于PI,但是适合于FITC,PE同时检测。红色荧光(Ex=488nm,Em=650nm)。

Hoechst 33258是一种蓝色细胞核荧光染料,嵌入双链DNA小沟,可以透过完整细胞膜。嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测,根据正常和凋亡时期染色质结构的差异。普通细胞核染色。蓝色荧光(Ex=352nm,Em=461nm)。

Hoechst 33342 是一种蓝色细胞核荧光染料,嵌入双链DNA小沟,可以透过完整细胞膜,对细胞毒性较低。常用于细胞凋亡检测,及普通细胞核染色。蓝色荧光(Ex=350nm,Em=461nm)。

货号

产品名称

规格

价格(元)

40710ES03

Propidium iodide Staining Solution(1mg/ml)碘化丙啶染液(1mg/ml)

1ml

265.00

40711ES10

PI (Propidium iodide) 碘化丙啶

10mg

189.00

40711ES60

PI (Propidium iodide) 碘化丙啶

100mg

1155.00

40712ES08

Rhodamine 123 罗丹明123

5mg

360.00

40713ES10

Dihydrorhodamine 123

10mg

1899.00

40722ES03

7-AAD 7-氨基放线菌素D

1mg

1438.00

40723ES10

5-TAMRA

10mg

325.00

40724ES10

Trypan blue 台盼蓝

10g

237.00

40727ES10

DAPI 4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐

10mg

459.00

40728ES03

DAPI染液(5mg/ml)

1mg (200μl)

198.00

40728ES10

DAPI染液(即用型)

10ml

98.00

40728ES50

DAPI染液(即用型)

50ml

335.00

40729ES10

Hoechst 33258

10mg

180.00

40729ES76

Hoechst 33258

500mg

3189.00

40729ES80

Hoechst 33258

1g

5310.00

40730ES03

Hoechst 33258 染液(1mg/ml) Hoechst 33258 Stain Solution (1mg/ml)

1ml

280.00

40730ES10

Hoechst 33258 染液(即用型) Hoechst 33258 Stain Solution (Ready-to-use)

10ml

90.00

40730ES50

Hoechst 33258 染液(即用型) Hoechst 33258 Stain Solution (Ready-to-use)

50ml

285.00

40731ES10

Hoechst 33342

10mg

215.00

40732ES03

Hoechst 33342 染液(1mg/ml)Hoechst 33342 Stain Solution (1mg/ml)

1ml

295.00

40732ES10

Hoechst 33342 染液(即用型)Hoechst 33342 Stain Solution (Ready-to-use)

10ml

98.00

40732ES50

Hoechst 33342 染液(即用型)Hoechst 33342 Stain Solution (Ready-to-use)

50ml

325.00

40744ES60

Hoechst 33342/PI 双染试剂盒 Hoechst 33342/PI Double Stain Kit  

1KIT(100 T)

219.00

40745ES64

7-AAD Viability Staining Solution 7-AAD细胞活力染色液

150T

169.00

40746ES01

吖啶橙/EB检测试剂盒

1KIT

527.00

40747ES76

Calcein-AM/PI 活细胞/死细胞双染试剂盒 Calcein-AM/PI Double Stain Kit

500T

659.00

40747ES80

Calcein-AM/PI 活细胞/死细胞双染试剂盒 Calcein-AM/PI Double Stain Kit

1000T

1089.00

 

2.细胞核定位载体

细胞核定位载体用于研究重组蛋白在细胞核(Endoplasmic reticulum)的定位及功能的便利的工具。研究人员可以根据自己的研究目的选择相应的定位表达载体,再将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。 

阳性对照可以表达GFP,且同样定位在细胞核上。

 

 

 

 

400-6111-883