本试剂盒配备了强力的裂解缓冲液,可以快速裂解样品(如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等),释放基因组DNA。裂解液可以直接加入到PCR反应体系中,无需精提纯化,操作方便。此外,本试剂盒对样品投入量要求低,5 mg小鼠组织或1-5 mm鼠尾即可进行实验。本试剂盒是小鼠组织直接PCR试剂盒(Cat#10185)的裂解组分,裂解后的产物与小鼠组织直接PCR试剂盒中2×Mouse Direct PCR Mix(10185-C)或2×Hieff® HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) (Cat#10108)搭配使用,扩增效果更佳。
产品组分
编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
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19697ES50(50 T) |
19697ES70(200 T) |
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19697-A |
Buffer ML |
5 × 1 mL |
1 × 20 mL |
19697-B |
Buffer MT |
0.6 mL |
2 × 1.25 mL |
运输与保存
冰袋运输。
保存方法
1. 组分 A:2-8℃保存,有效期1年。若多次使用,请分装冻存,避免交叉污染。
2. 组分 B:-20℃保存,避免反复冻融。有效期1年。
注意事项
1.为了避免样本间交叉污染,每次取样后都需要将取样器材的刃口或与样本直接接触的部位浸入2%次氯酸钠溶液中,反复 洗刷数次,然后用干净的纸巾擦干残余液体后再进行使用。为了试验方便,也可准备多个取样器材,在使用完后进行统一清洗,确保每一单独样本均使用的是无污染的取样器材。
2. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响 PCR 效率。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。
4. 本产品仅作科研用途!
操作方法
样品基因组DNA释放
1. 剪取5-10 mg 动物组织或1-5 mm 鼠尾,置于 1.5 mL离心管中;
2. 在上述离心管中加入90 μL Buffer ML,轻轻涡旋使得样品完全被裂解液浸润,短暂离心;
3. 在恒温孵育仪中设置 95℃孵育 15 min;
4. 加入10 μL Buffer MT,轻弹混匀,终止裂解;
5. 选做步骤:12000 rpm 离心2 min;
6. 将上清转移至新的离心管,4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续PCR扩增。
【注】:组织应尽量剪碎,以便裂解反应更顺利进行。
【注】 :95℃孵育,一般15 min 即可满足多数PCR 需求。若需要的DNA量较大或样品较难裂解,可将时间延长至 30 min。 组织块不需完全裂解,残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
HB210805