推荐应用
外泌体蛋白专用裂解液是专门针对外泌体样本研发的裂解试剂,可高效裂解外泌体蛋白,该裂解液已添加蛋白酶抑制剂,可有效抑制蛋白降解。使用时与外泌体样本1:1混匀即可,裂解后的蛋白样品可用于BCA、Western Blot 等实验。本试剂含有较高浓度的去垢剂,不适用于Bradford法测定蛋白浓度。
本产品的主要成分为Tris (pH7.4), NaCl, Triton X-100, sodium deoxycholate, SDS, EDTA, PMSF, Protease Inhibitor Cocktail(AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A)等。
使用说明
1.实验准备:实验前先将裂解液2~8 ℃融化混匀后置于冰上;
2.将外泌体样本与裂解液按体积比1:1混匀后置于冰上裂解10 min;
3.于4 ℃以11,200×g(~12,000 rpm*)离心5 min取上清,用BCA法测定蛋白浓度及进行Western Blot等后续实验;
*为约7 cm有效离心半径的小离心机换算(≤2 mL离心管)。
注意事项
1.本产品含有蛋白酶抑制剂,避免反复冻融,建议分装冻存;
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃条件下进行;
3.裂解后蛋白浓度应小于2 μg/μL,以保证裂解充分;
4.本产品仅用于生命科学研究,不得用于医学诊断及其它用途;
实验说明:
同一外泌体样本通过不同试剂进行裂解,定量后进行Western blit检测。
实验条件:
SDS-PAGE胶:10%分离胶
样品上样量:10 μg
一抗:CD63 antibody,1:2000稀释,4℃孵育过夜
二抗:mouse IgG,1:10000稀释,室温孵育50 min
曝光时间:5 s

冰袋运输,-20 ℃存储,有效期1年。
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