分子生物学
IVD分子诊断
细胞培养与分析
蛋白研究
细胞因子
重组蛋白
抗体
高通量测序建库
病原检测UCF系列
生物医药
工具酶
抑制剂激活剂与常用试剂
仪器
耗材
Blood Advanced Direct PCR Kit
分享
收藏
产品详情
FAQ
产品文档
已发表文献
推荐应用
产品介绍

Blood Advanced Direct PCR Kit是一款可直接对全血样本进行PCR扩增而无需进行DNA纯化或样本预处理的试剂盒,兼容含EDTA、肝素、柠檬酸盐等常规抗凝剂的新鲜血液、冷藏(冻)血液及Whatman903®和FTA®商用干血渍。试剂盒中含有经过经基因工程改造的DNA Polymerase组合,具有保真性高、对PCR抑制剂耐受性强的特点,2× Hieff® Blood Advanced PCR Buffer中添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系,能够在快速延伸条件下高效扩增8 kb的基因组片段,对于2 kb以下的片段,设置3-5 sec/kb延伸时间即可完成扩增,从而大幅缩短血液样本的鉴定及检测时间。

Hieff® Advanced High-Fidelity DNA Polymerase Mix的扩增产物的3’端为平末端,适用于一步法快速克隆及TOPO克隆试剂盒(Yeasen CAT# 10907/10908/10909/10910/10911/10912/10922)。

试剂盒中提供的引物预混液Positive control primer mix (10 μM each)能够从哺乳动物和大多数脊椎动物的sox21基因上游保守序列中扩增出长度237 bp的片段,可作为阳性对照使用。

产品特色
  • 扩增速度快
  • GC兼容性高
  • 模板耐受性强
  • 物种适用性广
应用案例
  • 扩增长度高达8 kb

使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人全血中扩增不同长度DNA片段。血样为-20℃储存的EDTA抗凝血,血液模板浓度为10%,延伸时间设置10 s/kb。M为10510ES60(Yeasen)。

  • 延伸速度快

使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人全血中扩增2 kb长度、GC含量71%的DNA片段。血样为-20℃储存的EDTA抗凝血,血液模板浓度为10%,延伸时间设置梯度1-10 s/kb,M为10510ES(Yeasen)。

  • 物种适用性广

使用Positive control primer mix引物直接从不同物种、不同抗凝剂的全血及血卡中扩增237 bp的DNA片段。血液模板浓度为10%,血卡模板为1 mm2大小。NTC (no template control) 为DEPC水作为模板,PC (positive control)为提取纯化的人基因组DNA作为模板。M为10510ES60(Yeasen)。1.人EDTA抗疑血(-20°C);2.小鼠EDTA抗凝血(新鲜);3.山羊EDTA抗凝血(-80℃);4.人血卡;5.人肝素抗疑血(-80°C);6.鸡肝素抗凝血(新鲜);7.猪柠檬酸钠抗疑血(4°C);8.NTC (no template control);9.PC (positive control)。

  • 耐受性强

图4A. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从人EDTA抗凝全血中扩增2 kb长度、GC含量71%的DNA片段。血液模板浓度设置梯度0.5-50%,延伸时间为10 s/kb。图4B. 使用Blood Advanced Direct PCR Kit直接从小鼠EDTA抗凝全血中扩增2.2 kb长度、GC含量67%的DNA片段。血液模板浓度设置0.5-50%,延伸时间为10s/kb。M为10510ES60(Yeasen)。

存储条件

干冰运输。-20℃保存,有效期1年。

FAQ
无扩增产物或产量少产物呈现高分子量弥散条带产物呈现低分子量弥散条带
检查引物设计,确认引物浓度和纯度提高退火温度或设置退火梯度电泳前离心取上清
重复实验,确认体系、程序无误延伸时间不应过长提高退火温度或设置退火梯度
增加循环数尝试不同的血液用量尝试不同的血液用量
优化退火温度减少循环数减少循环数
尝试不同的血液用量降低引物浓度降低引物浓度
重新设计引物 重新设计引物


COA
已发表文献
实时荧光定量PCR原理与分析方法
PCR实验超详细通关攻略
快速PCR操作流程演示
联系我们
购物车
客服
转染试用