DNA Marker是分子量不同的DNA片段的组合,主要用途为DNA分子凝胶电泳时,与样品共同加入凝胶中进行电泳分离,通过样品条带与DNA Marker对应条带大小及亮度的对比,可以粗略估算样品DNA分子量的大小以及在溶液中的浓度。翌圣生物DNA Marker分子量大小范围覆盖了从100 bp到15 kb的DNA片段,符合绝大多数实验需求。
产品特点
1、稳定性强,可在室温保存3-6个月;
2、背景干净、带型稳定、大小精准;
3、含指示带,各条带浓度已知,便于定位及半定量分析;
4、含上样缓冲液,可直接电泳,方便快捷;
5、附有5×loading buffer,可供样品加样使用。
电泳图示
在传统的细胞培养中,含血清培养基被广泛使用。血清中含有丰富的营养成分和生长因子,能够支持细胞的生长和增殖。然而,血清培养也存在诸多缺点。
注意事项
1、保存方法:室温稳定保存3~6个月,更长时间请于4℃或-20℃保存。
2、DNA Marker适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3、凝胶浓度及缓冲液的选择:
琼脂糖浓度 |
有效分离范围(bp) |
推荐缓冲液 |
0.5% |
2000-50000 |
1×TAE |
0.8% |
800-10000 |
1×TAE |
1.0% |
400-8000 |
1×TAE |
1.2% |
300-7000 |
1×TAE |
1.5% |
200-3000 |
1×TAE/0.5×TBE |
2.0% |
100-2000 |
1×TAE/0.5×TBE |
3.0% |
25-1000 |
0.5×TBE |
【注】:大片段选择低浓度凝胶,用TAE缓冲液体系电泳;小片段选择高浓度凝胶,用TBE缓冲体系电泳。
4、核酸染料的选择:
EB(溴化乙锭)是一种高灵敏的荧光染色剂,最大激发波长为302 nm,可用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。EB与核酸中的碱基嵌合式结合,具有一定的毒性。
YeaRed(Cat#10202ES76)和YeaGreen(Cat#10204ES76)是一种新型无毒核酸染料,具有独特的油性分子结构,不能穿透细胞膜进入细胞内,不易挥发升华,人体不会吸入,从而保证了实验者安全。艾姆斯氏测试结果也表明YeaRed、YeaGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。另外,YeaRed与EB具有相同的光谱特性,故无需改变现有的成像系统即可完美取代EB。
FAQ
为什么DNA Marker大分子条带拖带分不开?
核酸染料与DNA Marker结合不充分。因为大分子条带需要结合的核酸染料更多,若核酸染料不饱和,大分子条带更易受到迁移的影响,导致拖带分不开。建议减少DNA Marker的使用量(可用水稀释5倍后取8-10 μL进行上样)或提高核酸染料的浓度。
为什么DNA无条带或条带弱?
1)DNA上样量不够,需加大上样量;
2)DNA条带已跑出凝胶;
3)DNA条带被示踪染料遮盖;
4)凝胶中未加核酸染料;
5)琼脂糖凝胶放置太久,建议现配现用。
为什么DNA Marker条带弥散?
1)DNA有部分降解,检查放置条件是否温度过高;
2)电泳时电压过低,使DNA条带发生扩散,电压建议110v-130v,45 min以上跑胶;
3)琼脂糖凝胶浓度不合适,根据说明书建议的凝胶浓度配制;
4)琼脂糖凝胶质量较差,建议重新配制。
为什么样品条带与DNA Marker条带相比,出现大小不一致现象?
建议将293无血清培养基保存在2 - 8℃冰箱中,避免光照和高温。开封后应尽快使用,避免长时间存放。
在使用无血清培养基过程中,如果出现细胞生长不良怎么办?
1)DNA的迁移不仅与实际大小有关,也与是否结合有蛋白、离子状态、DNA结构、凝胶等因素有关。核酸的电泳迁移率与DNA/染料的量的比例关系比较重要,当核酸染料量不足时,就会发生迁移率误差较大的情况;
2)样品中如果含有较高的盐离子浓度,也会引起较大的迁移误差;
3)样品上样量与DNA Marker条带的量相差较大或体积相差较大时,也会引起较大的迁移误差。
订购信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
10501ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10502ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10504ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10505ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10507ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10510ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10511ES80 |
1 mL |
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10512ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10515ES60/80 |
100 T/10×100 T |
|
10516ES60/80 |
100 T/10×100 T |
|
10517ES60/80 |
100 T/10×100 T |
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10518ES60/80 |
100 T/10×100 T |
相关产品
产品名称 |
货号 |
规格 |
10202ES76 |
500 μL |
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10204ES76 |
500 μL |
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10208ES60/76 |
100 g/500 g |
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10213ES08 |
5×1 mL |
|
10212ES08 |
5×1 mL |