YeaGreen适用于蓝光条件下观察条带，安全无毒！

产品简介

 

YeaGreen是一种独特的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内，不易挥发升华，人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明YeaGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性，因此相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。适用于各种大小片段核酸的电泳染色，对核酸迁移率的影响远小于SYBR Green I。适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶，室温下在酸或者碱性缓冲液中极其稳定，耐光性强。

YeaGreen适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色，可选择胶染法或泡染法进行染色，使用非常方便灵活。同SYBR Green I的光谱性质，能在可见光凝胶透射仪（蓝光透射仪）和蓝光切胶仪下直接观察，也适用于使用488 nm激发的紫外凝胶成像透射仪。

 

储存条件

 

常温避光保存，有效期3年。

 

使用方法

 

1. 胶染法（同EB，电泳前染色）

1）配制合适浓度的琼脂糖凝胶，微波炉加热至完全熔化。

2）制胶时加入YeaGreen核酸染料，使用终浓度为1×（每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL YeaGreen 10,000×水溶液，以此类推）。

3）将含有YeaRed核酸染料的琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子，室温下凝固约30-60 min。

4）按照常规方法上样并电泳。

5）蓝光扫描仪、蓝光切胶仪下直接观察，或者紫外下拍照观察。

【注】：

a. 此方法比较节省染料，500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。

b. 由于YeaGreen 具有良好的热稳定性，可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。

c. YeaGreen兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

d. 如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。

e. 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

2. 泡染法（电泳后染色）

1）配制合适浓度的琼脂糖凝胶，微波炉加热至完全熔化。

2）将琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子，室温下凝固约30-60 min。

3）按照常规方法进行电泳。

4）用H₂O将YeaGreen 10,000×水溶液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中，制成3× 染色液。（如将15 μL YeaGreen 10,000×水溶液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H₂O中）。

5）将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10%聚丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30 min到1 h，并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。

6）蓝光扫描仪、蓝光切胶仪下直接观察，或者紫外下拍照观察。

【注】：

a. 用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

b. 3×YeaGreen染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

c. Marker上样量为5 μL，若为宽胶孔，需适当增加上样量；

d. 建议使用0.7-1.2% Agarose，电压4-10 V/cm，1×TAE缓冲液电泳。

 

注意事项

 

1. 关于核酸染料相关产品的选择：

1）如果您使用紫外成像仪，建议选择YeaRed（Cat#10202ES）核酸染料，是EB的无毒替代品，具有同EB相同的光谱特性；如果您使用可见光透射仪或希望在可见光（蓝光）下观测，请选择YeaGreen，在凝胶染色中是SYBR Green I的完美替代品，安全无毒。

2）YeaGreen虽然具SYBR Green I相似的光谱特性，且在凝胶染色方面效果优于SYBR Green I，但不建议用于qPCR。建议使用专为此用途设计的RTGreen（Cat#10207ES）。

2. 少数情况下，质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低的问题，此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更适合。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20241203