产品描述
RTGreen是一种与SYBR Green I具有相似光谱特性的DNA结合染料,独特的工作特性使其不仅可用于荧光定量PCR(qPCR),而且可用于高分辨率溶解曲线(HRM)分析。相比较于SYBR Green I,优势主要表现在以下三个方面:
1)RTGreen对PCR 抑制性远小于SYBR Green I
智能化的“按要求释放”DNA 结合技术赋予RTGreen对PCR的低抑制性。正因如此,PCR实验中可使用高浓度的RTGreen从而获得大大增强的扩增信号。高浓度的RTGreen消除了“染料重分布”的缺陷,使其既可用于多重PCR,也可用于HRM分析。
2)RTGreen的稳定性极强
在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。然而SYBR Green I很不稳定而且降解后对PCR 抑制性更强。
3)RTGreen降低细胞膜通透性,操作更加安全
细胞膜穿透性测试表明,RTGreen 几乎不能穿透细胞膜,安全性高。RTGreen 既没有诱变性也没有细胞毒性。相反,虽然 SYBR Green I 本身诱变性很弱,但它在细胞中可能抑制了正常DNA 的修复机制,使其有诱变增强作用。
另外,RTGreen具有优越的兼容性,能够和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用RTGreen替代SYBR Green I,无需改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备,非常方便。
运输与保存方法
冰袋运输。4℃干燥避光保存。保质期12个月。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
操作步骤(亦可使用实验室常用的SYBR Green I qPCR操作流程)
1.参照下表配制qPCR反应体系(50 μL)
组分 |
使用量 |
10×polymerase buffer without magnesium |
5 μL |
50 mM MgCl2 |
2.5 μL |
2 mM dNTP |
5 μL |
20× RTGreen |
2.5 μL |
Taq DNA polymerase |
1-5 U |
each of primers (final concentrations) |
0.1-1 μM |
ddH2O |
Up to 50 μL |
【注】:
1)使用RTGreen染料进行qPCR反应的Mg2+最佳推荐浓度是2.5 mM。
2)使用Hotstart Taq DNA polymerase可以得到更理想的扩增效果,但需要根据经验调整工作体系。
2.热循环荧光检测仪内进行PCR扩增,并在退火或延伸步骤实时记录荧光信号。
相关产品
产品名称 |
货号 |
规格 |
10201ES03 |
1 mL |
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10202ES76 |
500 μL |
|
10204ES76 |
500 μL |
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10208ES60/76 |
100/500 g |
|
10214ES08/25 |
5/25 g |
|
10501ES60/80 |
100/1000 T |
HB210824