产品描述
EveGreen是一种新一代用于实时定量PCR（qPCR）的DNA结合染料。该染料基于“按要求释放”DNA结合技术设计，结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体，在没有DNA存在时，该结构呈无荧光环状结构，一旦有DNA出现，则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。
与市场上其他荧光染料如FAM、SYBR Green I相比，EveGreen具有更卓越的特性：1）极高的灵敏度：在推荐浓度下使用时可以获得比SYBR Green I更强的PCR扩增信号。2）PCR抑制性极小，非常适合多重PCR及HRM分析：智能化“按要求释放”DNA结合技术使得EveGreen对PCR的抑制远小于SYBR Green I。因此，使用EveGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。同时，EveGreen在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。较高浓度的EveGreen也消除了“染料重分布”的缺陷，在推荐浓度下使用时，无扩增子之间的染料迁移现象，使EveGreen既可用于多重PCR，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析(HRM)。3）超强稳定性：在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。4）安全性好：细胞膜穿透性测试表明，EveGreen几乎不能穿透细胞膜，安全性高。且EveGreen没有诱变性和细胞毒性。5）优越的兼容性：和SYBR Green I光谱相似，和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EveGreen 替代SYBR Green I，无需改变任何目前使用的操作步骤和仪器设备。
此外，EveGreen是目前仅有的可以用于微滴式数字PCR系统的染料，在微流控PCR，恒温扩增，毛细管电泳，DNA定量以及细胞活力鉴定等领域也具有卓越的表现。本品以20×EveGreen水溶液形式提供。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃避光保存，保质期24个月。

注意事项

1）做qPCR时注意设置阳性和阴性对照。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）本产品仅作科研用途！

 

使用方法

1．按照下表根据所配制体系计算各组分用量*

Reagent	Final concentration in the mixture
ddH2O	Adjust to final volume
Taq polymerase buffer without magnesium	1×
dNTP	0.2 mM each
MgCl2	2.5 mM
EveGreen	1×
Taq DNA polymerase	1-5 units per reaction
Each of primers	0.1-1 uM

【注】：
 1）请根据不同的仪器类型，不加入或加入合适浓度的参比染料ROX。
 2）该体系需根据所使用的Taq酶的不同进行适当优化。

2．根据实验用量于冰上向无菌离心管中依次加入水，Taq polymerase buffer, dNTPs, MgCl2, EveGreen, Taq polymerase, and primers等配制qPCR反应体系（1×Master mix）；

3．将1×Master mix 适量分装至无菌PCR管中，并加入DNA (50 ng/反应).

4．按照仪器类型选择合适的扩增程序。

相关产品

产品名称	货号	规格
Hieff® qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox )HOT	11201ES03/08	1/5 mL
Hieff® qPCR SYBR® Green Master Mix (Low Rox Plus) HOT	11202ES03/08	1/5 mL
Hieff® qPCR SYBR® Green Master Mix (High Rox Plus) HOT	11203ES03/08	1/5 mL

HB210824