产品简介

 

琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

本品为PCR级高分辨率琼脂糖，对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率，适宜分离20 bp-800 bp的DNA片段，其分离效果可与聚丙烯酰胺相媲美。此外，还具有如下特点：

1. 易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；
2. 很低的背景；
3. 品质稳定等。

 

琼脂糖的基本参数，包括：

1）硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；

2）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；

3）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点；

4）电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

 

储存条件

 

室温干燥保存，有效期5年。

 

注意事项

 

1. 可用煮沸或微波加热的方法来熔胶，琼脂糖熔化必须彻底！此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。熔胶可能会引起暴沸，需注意防止烫伤。微波炉中加热时间不宜过长。
2. 用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途！

 

产品性质

CAS号（CAS NO.）	39346-81-1
外观（Appearance）	白色至类白色粉末
凝胶强度（Gel Strength, 1.5%）	≥750 (g/cm2)
凝胶温度（Gel Point, 1.5%）	≤33℃
熔胶温度（Melting Point, 1.5%）	≤70℃
电渗值（EEO, -mr）	≤0.10
硫酸盐（Sulfate, %）	≤0.10%
水分（Moisture）	≤10%
灰分（Ash Content）	≤0.5%
DNA酶（DNase）	None Detected
RNA酶（RNase）	None Detected
蛋白酶（Protease）	None Detected
核酸内切酶（Endonuclease）	None Detected

 

使用说明

 

凝胶制备方法

1. 配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。

*用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。

2. 根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约30 sec，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1 min（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。

*必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4. 使溶液冷却至60℃左右，加入翌圣YeaRed核酸染料（Cat#10202ES，适用于紫外）或YeaGreen（Cat#10204ES，适用于蓝光），使用终浓度为1×（即每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL YeaRed/YeaGreen 10,000×水溶液）。
5. 将含有YeaRed/YeaGreen核酸染料琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5 mm之间。
6. 在室温下使胶凝固（大约30 min-1 h），然后放置于电泳槽中进行电泳。

*凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存2～5天。

7. 按照常规方法上样并电泳。
8. 紫外拍照观察。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

线性DNA片段大小（bp）	20-250 bp	50-500 bp	100-1200 bp	500-2000 bp
琼脂糖浓度（%）	5.0	4.0	3.0	2.0

 

 

Ver.CN20250212