一、快速解决核酸残留问题,能带来什么收益?

图1. (+)添加和(-)不添加全能核酸酶处理的CHU1756NGS覆盖图[1]
在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中,用全能核酸酶处理含有核酸的蛋白样品,可提高分辨率,并提高回收率。

图3. 小鼠脑核蛋白Benonase处理(A)和未处理(B)双向电泳比较图[2]

二、翌圣全能核酸酶,匹配市场应用,快速解决核酸残留!

图4. 核酸酶纯度验证(Purity>90%)及全能核酸酶酶活效率验证(>250U/mg)
(2)核酸酶超强特性
a、耐受性强
能够与多种细胞裂解液同时使用,如RIPA;与含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。
试剂 |
耐受剂量 |
耐受程度 |
盐酸胍 |
>100 mM |
完全抑制 Benzonase 活性 |
EDTA |
1 mM |
部分抑制 Benzonase 活性 |
5 mM |
活性丧失 90% |
|
PMSF |
1 mM |
不会抑制 Benzonase 活性 |
Triton® X-100 |
浓度<0.4% |
保持 70%的活性 |
浓度<0.4%<1% |
活性急剧降低 |
|
浓度 >1% |
活性丧失 70% |
|
SDS |
浓度在 0.1%~1% |
活性急剧降低 |
尿素 |
>6 M |
活性急剧降低 |
b、操作简易,轻松使用
推荐使用条件
条件参数 |
最佳条件 |
有效条件 |
Mg2+ |
1–2 mM |
1–10 mM |
pH |
8–9 |
6–10 |
温度 |
37°C |
0–42°C |
DTT |
0–100 mM |
>0 mM |
巯基乙醇 |
0–100 mM |
>0 mM |
单价阳离子 |
0–20 mM |
0–150 mM |
磷酸根离子 |
0–10 mM |
0–100 mM |
推荐使用量
实验类型 |
蛋白电泳样品 |
药物生产-1g |
疫苗、病毒生产-1L |
细胞培养-1L |
推荐产品 |
Benzonase(科研级,20156) |
Benzonase(无内毒素级,20125) |
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最低要求 |
125 U(0.5 μL) |
25 U/mL(1 μL) |
0.1 U/mL(0.4 μL) |
0.1 U/mL(0.4 μL) |
建议用量 |
500 U(2 μL) |
250 U/mL(10 μL) |
25 U/mL(100 μL) |
5 U/mL(20 μL) |
孵育时间 |
通常作用时间37℃在15~60 min;25℃在30~120 min; |
|||
注:以上仅仅是推荐,可根据实验自主摸索最优实验条件。 |
(3)FAQ——如何摆脱后续核酸酶干扰?
措施1:采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性,极端条件会造成不可逆失活,例如100 mM NaOH,70℃处理30 min等;
措施2:对于带某种标签的Benzonase核酸酶可通过相应的标签蛋白纯化树脂直接去除,去除率>95%;
措施3:对于不带标签的Benzonase核酸酶,可通过色谱纯化去除核酸酶,然后可通过检测残留活性或ELISA检测来判断去除是否成功。
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
20156ES25 |
25 KU |
20156ES50 |
50 KU |
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20156ES60 |
100 KU |
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Benzonase Nuclease (Endotoxin-free) 全能核酸酶(无内毒素) |
20125ES25 |
25 KU |
20125ES50 |
50 KU |
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20125ES60 |
100 KU |
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20127ES25 |
25 KU |
20127ES50 |
50 KU |
|
20127ES60 |
100 KU |