Salt Active UltraNuclease GMP-grade（耐高盐全能核酸酶）是一种来源于海洋微生物的重组非特异性核酸内切酶，与UltraNuclease相比在0.5M NaCl条件下具有最佳活性，广泛应用于生产工艺流程中，有效去除核酸污染。

本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化，不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究；还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂，将宿主残留核酸降至皮克（pg）级别从而提高生物制品功效和安全性；并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞（PBMC）的结团。

本品以无菌液体酶的形式提供，储存于缓冲液（25 mM Tris-HCl，5 mM MgCl₂，500 mM NaCl，50% Glycerol，pH 7.5）中，无色透明液体。

产品性质

来源	E. coli
分子量（Molecular Weight）	24.7 kDa
等电点	9.61
纯度（Purity）	≥ 99%
酶活（Enzyme Activity）	250-300 U/μL
温度（Optimum Temperature）	37℃（工作范围0-42℃）
辅助因子（Cofactor）	1-10 mM Mg2+
储存缓冲液（Storage Buffer）	25 mM Tris-HCl，5 mM MgCl2，500 mM NaCl，50% Glycerol，pH 7.5
活性单位定义（Unit Definition）	一定条件下，在底物过量时 37℃ ，30 min 内 260 nm 处吸光值变化 1.0 所需要的酶量定义为一个活性单位（U）。

 

运输和保存方法

干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存，有效期2年。若是打开包装后并4℃放置超过一周，建议过滤除菌防止微生物污染。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

1、样本准备

贴壁细胞：去除培养基，用PBS清洗细胞，去除上清。

悬浮细胞：离心收集细胞，用PBS清洗细胞，6,000 rpm 离心10 min，收集沉淀。

大肠杆菌：离心收集菌体，用PBS清洗1次，8,000 rpm 离心5 min，收集沉淀。

2、样品处理

将收集到的细胞沉淀按照质量（g）与体积（mL）比1：(10~20) 的比例进行裂解处理，也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞（1 g细胞约为10⁹个）。

3、酶的添加

1. 添加适量MgCl₂将反应体系中的Mg²⁺ 浓度调整在1-5 mM范围内，将pH调整成7.5-9。

2．按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加Salt Active UltraNuclease，37℃孵育30min以上。也可以自行选定添加方案，在一定范围内增加酶量，消化所需时间相应减少。

【注】耐高盐全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响，初次使用时建议摸索最适浓度。

4、上清获取

以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清，再进行后续相关实验。

【注】若溶液偏酸性或者偏碱性，含有较高浓度的去垢剂、变性剂，应适当增加酶的用量或延长孵育时间。

HB220922