病原UCF解决方案 | 钩端螺旋体病检测，发热快筛还是病原分型？qPCR与tNGS双技术路径
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2026-08-18
钩端螺旋体病是由致病性钩端螺旋体引起的人兽共患病，常通过接触被动物尿液污染的水体或土壤，经破损皮肤和黏膜感染。洪涝灾害、稻田作业、水上活动及啮齿动物暴露均可能增加风险。早期症状常与登革热、疟疾、恙虫病和汉坦病毒感染等急性发热性疾病相似，重症可进展为黄疸、肾衰竭、肺出血等魏尔病表现。
钩端螺旋体病检测应该选qPCR还是tNGS？对有明确暴露史的急性期患者进行快速定向检测，或开展动物宿主与环境风险监测时，qPCR流程短、结果直接，是优先技术路径；当临床表现缺乏特异性、常规结果相互矛盾，需要一次覆盖多类急性发热病原，或进一步分析致病性钩体种、血清群相关标志与基因型时，可采用靶向tNGS。
更合理的分工是：qPCR承担早期快速检测和规模化监测，tNGS承担复杂AFI症候群鉴别、病原分型和流行病学研究。疑似重症患者的临床处置强调时效性，不应等待tNGS结果后才启动规范评估和经验性治疗。
【原料解决方案】针对钩端螺旋体病分子检测，翌圣生物提供从病原核酸提取、qPCR扩增，到tNGS多重扩增原料及RDC定制开发的支持，服务于疾控、海关、检测机构、动物疫控及IVD企业的快检、联检和分型方案。
钩端螺旋体在不同病程阶段的样本分布会发生变化：急性期可关注血液，随后尿液中的病原核酸可能更具检测价值；严重病例还可能涉及脑脊液或组织等样本。方案验证应覆盖采样时机、抗菌药物使用、低载量回收、宿主核酸背景、抑制物和冷链运输，避免用单一样本或单一时间点的阴性结果排除感染。
qPCR可围绕致病性钩端螺旋体的保守区域和毒力相关靶标设计单重或多重体系，用于有明确暴露史的急性发热患者辅助检测、啮齿动物和家畜宿主筛查、洪涝后重点环境监测以及AFI联检产品开发。引物探针设计应通过广泛序列比对兼顾不同致病种和基因型，并验证与非致病性钩体及其他螺旋体的交叉反应。
通用型全预混、高灵敏并支持快速扩增的多重qPCR预混液，适合强调检测时效和批量通量的钩端螺旋体检测方案。
通用型高灵敏、防污染多重qPCR预混液，适合复杂血液或尿液基质及AFI多靶标联合体系开发。
可冻干的快速qPCR预混体系，适合需要常温运输、长期储存或现场应用形态的产品开发。
对于钩端螺旋体阳性样本，tNGS还可围绕致病种、分型相关区域和关键毒力基因获取序列信息，辅助病原分型、动物宿主关联和暴发调查。其分辨率取决于Panel覆盖、扩增均一性、测序深度和数据库；低丰度reads需要结合阴性对照、覆盖特征和独立方法复核。
4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0（Cat# 12977ES）支持2000 bp以内不同片段长度的多重扩增，适合分型基因和连续变异区域覆盖。
4× Hieff® Multiplex PCR Master Mix（Cat# 12948ES）可作为高重数靶标体系的扩增原料；具体病原组合、引物池和检测性能需由客户或通过RDC完成开发验证。
tNGS RDC（Research Development Center）可根据企业客户的钩端螺旋体病或急性发热多病原检测产品规划，提供病原与靶标筛选、Panel设计、引物池开发、扩增均一性优化、原料筛选、返样验证和产品定型支持。相关Panel需要按客户需求定制开发，并非现有标准化成品。
- 定制化IVD原料开发
- 分子诊断体系开发经验
- 高频交互与快速响应
- 转产放大与规模化生产
- ISO 13485质量体系管理
- 产能、品质及成本控制
- 高通量酶筛选与测试
- 发酵、纯化和分子酶研发
- 定制项目候选原酶支持
- 产学研联动
- 新酶发现与酶进化
- 定向改造与原料资源积累
明确暴露史的急性期快速检测：优先采用病原核酸提取＋qPCR，重点验证血液样本、低拷贝检出、内标监控和周转时间。
洪涝后人群、动物宿主与环境监测：采用自动化核酸提取＋qPCR，重点关注样本分层、通量、交叉污染和批间稳定性。
不明原因急性发热或复杂重症鉴别：在规范临床处置和常规检测基础上，可采用经过开发验证的多病原靶向方案＋tNGS扩大病原覆盖范围；如无现成方案，可通过RDC定制开发。
病原分型、宿主关联和暴发研究：根据所需分辨率定制分型靶标、长片段方案或更广覆盖的靶向测序方案。
明确靶标的早期快速检测和批量监测优先使用qPCR；如需多病原鉴别、致病种确认、分型或暴发研究，可使用经过验证的tNGS方案或开展RDC定制开发。
不能。病程、样本类型、抗菌药物使用、病原负荷和抑制物均会影响结果，应结合不同时点或不同类型样本、血清学及临床表现综合判断。
不能。疑似重症钩体病的评估和治疗具有时效性，不能等待tNGS或其他实验室结果后再决定；tNGS主要提供复杂鉴别和序列信息。
钩端螺旋体病检测既要争取早，也要在复杂急性发热病例中覆盖得更广。qPCR适合致病性钩端螺旋体的快速定向检测，以及人群、动物宿主与环境批量监测；病原tNGS适合AFI多病原鉴别、致病种和基因型分析、宿主关联与暴发调查。以qPCR承担前线快检，以tNGS补充病原谱和序列证据，再与暴露史、病程、血清学、培养及临床信息综合解释，可形成更清晰的分层技术路径。翌圣生物提供从病原核酸提取、qPCR扩增，到tNGS多重扩增建库和RDC定制开发的原料支持。
| 产品类型 | 产品功能 | 产品名称 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 核酸提取 | 提取试剂盒 | MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 | 18306ES |
| 核酸提取仪 | 96通道自动化核酸提取仪 | 80510ES | |
| qPCR Mix | 四代快速、低残留、全预混 | Hieff Unicon® Universal Superfast qPCR Mix（One Tube） | 16924ES |
| 三代全预混、低残留 | Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix（One Tube） | 16713ES | |
| 三代通用全预混 | Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix（One Tube） | 16710ES | |
| 二代全预混（5×浓度） | Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus） | 13891ES | |
| 一代全预混 | Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) | 13171ES | |
| 耐抑制性强 | Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES/11212ES | |
| 高灵敏、可冻干 | Hifair Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix (UDG plus) | 11893ES |
| 产品类型 | 产品功能 | 产品名称 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 核酸提取 | 提取试剂盒 | MolPure® Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 磁珠法病原DNA/RNA提取试剂盒 | 18306ES |
| 核酸提取仪 | 96通道自动化核酸提取仪 | 80510ES | |
| 一步法逆转录试剂盒 | 一步法逆转录多重扩增 | Hieff® Multiplex RT-PCR Kit多重RT-PCR 试剂盒 | 12950ES |
| 长片段一步法逆转录多重扩增 | Hieff® AccuLong Onestep Multiplex RT-PCR kit | 13315ES | |
| 多重扩增试剂 | 长片段多重扩增 | 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 2.0 4×多重PCR 预混液 | 12977ES |
| 超多重扩增 | 4×Hieff® Multiplex PCR Master Mix 4×多重PCR 预混液 | 12948ES | |
| 逆转录试剂 | 预混版逆转录 | Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix一链cDNA合成预混液 | 12958ES |
| 基础版逆转录 | Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Mix 一链cDNA合成预混液 | 12946ES | |
| 核酸清除剂 | 气溶胶核酸清除 | Non-Corrosive Nucleic Acid Remover无腐蚀核酸清除试剂 | 19710ES |
