产品简介   

Hieff Unicon® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Kit 是一款采用公司新一代抗体法热启动 Taq 酶的荧光定量 qPCR可冻干试剂，适合于 FAM/HEX/TET/JOE/ROX 等双标记探针（本品也适用于 Molecular Beacon 探针），试剂包含冻干保护剂、热启动 Fast Taq DNA 聚合酶、dNTP 等组分，可直接冻干上机。该制品不含有 ROX 校正染料，适配各种定量 PCR 机型。

 

产品信息

货号	11893ES60/ 11893ES80
规格	100 T / 1,000 T

 

组分信息

组分编号	组分名称	11893ES60	11893ES80
11893	Lyo-ReadyTaqMan qPCR Mix	2 mL	20 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

使用说明

1. 冻干上机体系

组份编号	组分	体积（μL）	终浓度
11893	Lyo-ReadyTaqMan qPCR Mix	20	1×
	Primer Mix (10 μM)*	x	0.1-0.5 μM
	Probe Mix (10 μM)	x	50-250 nM
	总体积	21-25	-

*引物浓度可根据实验要求适当调整，总体积不能超过5 μL。

2. 冻干程序

步骤	温度	设定时间	持续时间	真空度
预冻	-45℃	10 min	60 min	——
一次干燥阶段	-45 ℃	10min	60min	0.01mbar
	-40 ℃	10min	600min	0.01mbar
	-35 ℃	10min	120min	0.01mbar
	-30 ℃	20min	60min	0.01mbar
	-20 ℃	20min	60min	0.01mbar
	-10 ℃	20min	60min	0.01mbar
	0 ℃	20min	60min	0.01mbar
压力升测试
解析干燥阶段	5 ℃	10min	20min	0.01mbar
	10 ℃	10min	20min	0.01mbar
	15 ℃	10min	20min	0.01mbar
	20 ℃	10min	20min	0.01mbar
	25 ℃	10min	240min	0.01mbar
压力升测试

3. 反应扩增体系

组分	体积（μL）	终浓度
20 μL 体系冻干球	1 颗	1×
Primer Mix (10 μM)	x	0.1-0.5 μM
Probe Mix (10 μM)	x	50-250 nM
模板*	1-25	1×
ddH2O	up to 25	-

*模板用ddH₂O溶解，核酸提取试剂的洗脱液使用ddH₂O。

4. 参考扩增程序

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	15 sec	45
退火/延伸*	60℃	30 sec

*退火/延伸温度可根据实验要求适当调整。

5. 适用机型

Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;SLAN:SLAN-96S,SLAN-96P..  

 

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20240628