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细胞因子科学选型--不同表达系统来源

17840

2026-01-22

当目标细胞因子的种类确定后,研究者往往会发现其可通过多种异源表达系统进行制备。在此情况下,如何依据实验需求与产品特性,科学筛选最优的表达系统,是保障后续实验可靠性与结果准确性的关键前提。

     

一、 主要表达系统的类型及特点

对比维度

原核表达

(大肠杆菌)

酵母表达

(毕赤酵母/酿酒酵母)

昆虫细胞表达

(杆状病毒)

哺乳动物细胞表达(CHO/HEK293)

翻译后修饰

无(无糖基化、磷酸化)

有,高甘露糖型糖基化(非人类型)

有,部分复杂糖基化

有,天然人类型复杂糖基化

天然构象/生物活性

-中(易形成包涵体,需复性)

-高(分泌型表达,折叠较好)

高(接近天然构象)

最高(与天然细胞因子一致)

纯度与

内毒素

纯度高,内毒素易残留(需额外去除)

内毒素较低,糖基化杂质可能存在

内毒素低,纯度高

内毒素极低,纯度最高

产量与成本

产量极高,成本最低(适合大规模生产)

产量高,成本中低

(工业常用)

产量中,成本中高

产量低,成本最高(限制大规模)

标签与分泌表达

多为胞内表达(包涵体),常带His 标签

分泌型表达为主,易纯化,可带标签

分泌型表达,标签可选

分泌型表达,天然信号肽,可无标签

适用细胞

因子类型

非糖基化依赖型、小分子细胞因子

部分糖基化依赖型、中分子细胞因子

多数糖基化依赖型

高度糖基化依赖型、复杂构象细胞因子

典型

应用场景

体外结合实验、抗体包被、成本敏感的批量实验

体外功能实验、部分体内预实验、工业酶

体外活性实验、疫苗佐剂、部分体内实验

体内药效实验、临床前研究、治疗性产品

局限性

无修饰,活性低;内毒素风险;包涵体复性效率低

糖基化与人类不同,可能影响体内活性;部分蛋白易降解

产量有限,成本较高;糖基化仍有差异

成本高,产量低;周期长;易受污染

      

二、 场景化选择策略

建议根据“实验需求优先级→排除不满足的系统→最终匹配”的步骤进行选择。

1. 优先选原核表达(大肠杆菌)的场景

l核心需求是低成本、高产量、高纯度,且对生物活性要求不高

l具体案例:

¡体外ELISA实验的标准品/包被抗原(只需要抗原性,不需要活性);

¡抗体筛选的结合实验(只需要正确的抗原表位,不需要天然构象);

¡大规模的蛋白纯化工艺开发(用于方法学验证,而非功能实验);

¡研究的是非糖基化依赖型细胞因子(如IL-2、IFN-γ、TNF-α等小分子、无复杂二硫键的细胞因子)。

l选型注意点:务必确认产品是否经过复性处理(复性效率直接影响活性),以及内毒素含量(用于细胞实验时,内毒素需<1EU/μg,否则会激活免疫细胞,干扰实验结果)。

2. 优先选酵母表达(毕赤酵母)的场景

l核心需求是平衡成本与活性,需要分泌型表达的可溶性蛋白,且对糖基化的要求不是“天然修饰型”。

l具体案例:

¡体外细胞增殖/活化实验(如IL-4、IL-6诱导B细胞增殖,活性足够满足实验需求);

¡工业级的细胞因子原料生产(如用于细胞培养的添加因子,成本比哺乳动物细胞低一个数量级);

¡研究的是中度糖基化依赖型细胞因子(如部分趋化因子、生长因子)。

l选型注意点:毕赤酵母的糖基化是高甘露糖型,可能会被人类体内的甘露糖受体识别,导致快速清除,因此不适合用于体内长效实验,仅适合体外或短期体内预实验。

3. 优先选昆虫细胞表达的场景

l核心需求是接近天然的构象和活性,且对成本的接受度高于原核/酵母,但又不需要哺乳动物细胞的极高成本。

l具体案例:

¡体外高灵敏度的功能实验(如细胞因子的信号通路激活实验、受体结合动力学实验);

¡疫苗开发中的佐剂细胞因子(需要高活性来增强免疫反应);

¡研究的是复杂构象的细胞因子(如多亚基复合物、含多个二硫键的蛋白)。

l选型注意点:昆虫细胞的糖基化仍与人类有差异,部分细胞因子的体内活性可能低于哺乳动物细胞来源,因此适合作为哺乳动物细胞的“平替”,用于前期实验优化。

4. 优先选哺乳动物细胞表达的场景

l核心需求是天然的生物活性、人类型翻译后修饰、极低的内毒素,且实验结果需要直接对应体内或临床场景

l具体案例:

¡体内药效实验(如小鼠模型的肿瘤治疗、免疫调节实验,必须保证细胞因子在体内的长效性和天然活性);

¡临床前研究(用于治疗性细胞因子的开发,必须符合GMP标准,与天然人体细胞因子一致);

¡研究的是高度糖基化依赖型细胞因子(如EPO、G-CSF、IL-7、IL-15等,糖基化直接影响其半衰期、受体结合能力和生物活性);

¡干细胞培养(用于诱导干细胞分化、维持干细胞干性的细胞因子,必须保证天然构象和活性,避免对干细胞造成非特异性影响)。

l选型注意点:这是成本最高的表达系统,产量有限,因此适合用于关键实验的最终验证,而非前期的大规模筛选。同时,需确认产品是否为无血清培养,以避免血清蛋白的污染。

     

三、 快速决策总结

l低成本、高产量、体外结合实验→原核表达(大肠杆菌)

l平衡成本与活性、体外功能实验、工业生产→酵母表达(毕赤酵母)

l接近天然活性、体外高灵敏度实验、疫苗佐剂→昆虫细胞表达

l天然活性、体内实验、临床前研究、干细胞培养→哺乳动物细胞表达(CHO/HEK293)

     

翌圣生物开发了一系列专为细胞培养而设计的HiActi®细胞因子,经过严格的质量控制及细胞功能的验证,确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平。产品种类丰富,适用于干细胞、神经细胞、类器官、免疫细胞以及多种细胞系的培养及功能研究。

   

在细胞培养和治疗中,针对不同类型的细胞选择合适的细胞因子至关重要。以下是针对常见细胞类型的细胞因子选择指南,涵盖干细胞、免疫细胞、类器官和其他功能细胞等。

产品应用

产品货号

产品名称

产品货号

产品名称

产品货号

产品名称

T/NK细胞培养

90267ES

Human IL-2

90147ES

Mouse IL-7

90215ES

Human IL-21

90142ES

Mouse IL-2

90113ES

Human IL-15

90233ES

Mouse IL-21

90188ES

Human IL-7

90218ES

Mouse IL-15

90262ES

Human IL-12

细胞因子诱导的杀伤细胞培养(CIK细胞)

90267ES

Human IL-2

91207ES

Human IFN-γ

90100ES

Human IL-1α

90142ES

Mouse IL-2

91212ES

Mouse IFN-γ

90139ES

Mouse IL-1α

树突状细胞(DC细胞)培养

92259ES

Human FLT3L

90606ES

Human sCD40L

90140ES

Mouse IL-1 beta

91117ES

Human G-CSF

95589ES

Mouse sCD40L

90105ES

Human IL-4

91102ES

Human GM-CSF

90601ES

Human TNF-alpha

90144ES

Mouse IL-4

91115ES

Mouse GM-CSF

90621ES

Mouse TNF-α

90107ES

Human IL-6

91103ES

Human M-CSF

90100ES

Human IL-1 alpha

90146ES

Mouse IL-6

92116ES

Mouse M-CSF

90277ES

Human IL-1 beta

 

 

干细胞培养常用蛋白

92602ES

Human Laminin 521

92054ES

Human BMP-7

92804ES

Human EPO

92634ES

Human Laminin-511 E8

91303ES

Human FGF-4

92211ES

Human IGF-1

92619ES

Human Fibronectin

91304ES

Human KGF/FGF-7

92254ES

Human OSM

92549ES

Human Vitronectin

91306ES

Human FGF-10

90282ES

Human IL-11

91701ES

Human/Mouse/Rat TGF-β1

92251ES

Human SCF

90601ES

Human TNF-alpha

91709ES

Human/Mouse/Rat TGF-β2

92260ES

Mouse SCF

91708ES

Human/Mouse/Rat Activin A

91705ES

Human TGF-β3

90604ES

Human BAFF

95132ES

Human FGF8b

91330ES

Human bFGF/FGF-2

92279ES

Human FLT3L

92102ES

Human GDNF

91315ES

Mouse bFGF/FGF-2

91517ES

Human VEGF165

92128ES

Human NT-3

92708ES

Human EGF

92261ES

Human TPO

92123ES

Human CNTF

92702ES

Human HB-EGF

91605ES

Human PDGF-BB

90609ES

Human 4-1BBL

92703ES

Mouse EGF

92275ES

Human DKK1

92566ES

Human SHH

91102ES

Human GM-CSF

95124ES

Human DLL4

92288ES

Human Holo-Transferrin

91103ES

Human M-CSF

91117ES

Human G-CSF/CSF3

92289ES

Human Apo-Transferrin

91708ES

Human/Mouse/Rat Activin A

92711ES

Human NRG1-beta1

92210ES

Human LR3 IGF-1

90101ES

Human IL-1 beta

92111ES

Human LIF

92211ES

Human IGF-1

90104ES

Human IL-3

92256ES

Mouse LIF

92802ES

Human PTH

90107ES

Human IL-6

92055ES

Human HGF

93874ES

Human DLL-4

90189ES

Human IL-8

90108ES

Human IL-9

94207ES

Human DLL-1

92060ES

Human BMP-2

92129ES

Human/Mouse/Rat BDNF

 

 

92053ES

Human BMP-4

92122ES

Human beta-NGF

 

 

巨噬细胞培养常用蛋白

91207ES

Human IFN-γ

90109ES

Human IL-10

91102ES

Human GM-CSF

91212ES

Mouse IFN-γ

90149ES

Mouse IL-10

91115ES

Mouse GM-CSF

90105ES

Human IL-4

90112ES

Human IL-13

91103ES

Human M-CSF

90144ES

Mouse IL-4

90151ES

Mouse IL-13

91114ES

Mouse M-CSF

类器官培养常用蛋白

92294ES

Human Wnt-3a

91306ES

Human FGF-10

92711ES

Human NRG1-beta1

92278ES

Human RSPO1

91319ES

Mouse FGF-10

92566ES

Human SHH

92295ES

Mouse RSPO1

91304ES

Human FGF-7

91517ES

Human VEGF165

92623ES

Human Noggin

91316ES

Mouse FGF-7

91303ES

Human FGF-4

92291ES

Mouse Noggin

92055ES

Human HGF

92128ES

Human NT-3

92708ES

Human EGF

92053ES

Human BMP-4

92283ES

Human RSPO3

92703ES

Mouse EGF

92054ES

Human BMP-7

92129ES

Human/Mouse/Rat BDNF

91330ES

Human bFGF

92254ES

Human OSM

 

 

91315ES

Mouse bFGF

92516ES

Human Epiregulin

 

 

破骨细胞培养蛋白

95625ES

Mouse RANKL

91114ES

Mouse M-CSF

90633ES

Human RANKL

91103ES

Human M-CSF

 

 

 

    

 

细胞因子选购指南

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