翌圣生物HiActi®细胞因子产品使用指南
23
2026-09-22
细胞因子的活性通常用生物学活性单位（U）或国际单位（IU）表示，而非质量单位（如μg），原因是其功能依赖于正确的空间构象，而非单纯的蛋白含量。
例如：IL-2的比活为1×10⁷ IU/mg，若需使用1×10⁵ IU的IL-2，则所需蛋白质量为10 μg。冻干粉or预混液细胞因子？我该如何选择？
具有较好的储存稳定性，通常可在-20°C或-80°C条件下长期保存，且单位使用成本相对较低。
使用前需按照说明书进行复溶，复溶操作及保存方式可能影响细胞因子的活性；复溶后建议分装保存，尽量避免反复冻融。更适合：有长期储存需求、使用频率较低，或希望灵活配置不同工作浓度的实验场景。
即开即用，无需复溶，可减少配液步骤及人为操作误差，同时降低因复溶不当造成活性损失的风险。液体配方通常会通过优化缓冲体系，并视产品设计加入载体蛋白等成分，以提高储存和使用过程中的稳定性。
但相较冻干粉，其储存周期较短（即使是冷冻保存）且反复冻融风险高。更适合：使用频率较高、追求操作便捷性，或希望减少配液变量的实验场景。
简单来说：如果更看重长期储存、配置灵活性和成本，可优先考虑冻干粉；如果更看重即开即用、操作便捷和实验一致性，预混液会更加合适。
低成本、高产量、高纯度且对生物活性要求不高，体外结合实验→原核表达（大肠杆菌）
平衡成本与活性、体外功能实验、工业生产→酵母表达（毕赤酵母）
接近天然活性、体外高灵敏度实验、疫苗佐剂→昆虫细胞表达
天然活性、体内实验、临床前研究、干细胞培养→哺乳动物细胞表达（CHO/HEK293）
异源细胞因子会被动物的免疫系统当成“外来物”，快速清除，无法发挥作用，且可能引发免疫反应（如产生抗体、炎症），干扰你的实验结果，甚至导致动物死亡。
为提高实验结果的准确性，翌圣细胞因子不添加载体蛋白或者其他糖类或聚合物添加剂，通常采用低盐、高纯度冻干工艺。
对于小规格产品，由于冻干物含量较少，且运输过程中可能分散并附着于瓶壁或瓶盖，因此肉眼可能难以观察到管内产品。
此外，同一产品不同批次在纯化后可能呈现不同的物理形态：白色粉末状、透明胶状、透明薄膜状，但不同物理形态不会影响细胞因子活性，收到产品后，请您先离心后使用合适复溶稀释液（不同细胞因子的复溶及稀释要求可能存在差异，具体步骤请务必参考所使用的细胞因子说明书，确保本套装中的复溶液和稀释液与细胞因子说明书中“复溶方法/Reconstitution”指定的复溶液和稀释液保持一致。）进行复溶与稀释，最后进行分装储存及使用。
-20℃~-80℃避光保存，可稳定数月至数年（具体参考说明书），请避免室温放置。
细胞因子稀释后终浓度建议≥100 μg/mL，按单次实验用量分装，分装量建议为单次使用量的1.1‑1.2倍，每管分装体积不低于 20 μL。-20℃可短期保存1-2周；-80℃用于1-3个月长期保存。部分细胞因子建议添加 BSA、胎牛血清等载体蛋白以提升稳定性。
-80℃避光保存，可稳定1年左右（具体参考说明书），建议您根据单次实验需求进行分装（建议分装量为单次使用量的1.1~1.2倍），且分装体积不少于20 μL/管。
在细胞因子储存与实验应用中，载体蛋白是一类用于保护细胞因子活性、防止其降解与聚集的惰性蛋白，本身不参与实验反应，仅作为“稳定剂”发挥作用：减少细胞因子在耗材表面的非特异性吸附，并降低聚集、变性及冻融带来的活性损失。对于需要长期保存的重组蛋白，加入合适的载体蛋白有助于提高其稳定性。
载体蛋白类型：0.1% 牛血清白蛋白（BSA）、5% 人血清白蛋白（HSA）、10% 胎牛血清（FBS）或5%海藻糖等，不同细胞因子的复溶及稀释要求可能存在差异,请参考具体细胞因子说明书或实验类型，选择合适的载体蛋白。
最佳选择：0.1%-1.0%的无蛋白酶BSA的PBS（41412ES）或无血清培养基。BSA能有效防止吸附，并稳定细胞因子。
替代选择：对于某些对BSA敏感的应用（如后续动物注射或临床前研究），可使用重组人血清白蛋白或胎牛血清。
切勿使用纯水或无蛋白缓冲液直接稀释。
翌圣生物细胞因子产品大部分为冻干粉，少量产品为液体。若产品为液体形式，请先短暂离心，将附着在管壁和管盖上的产品离心至底部，避免试剂损失与浓度偏差，保障实验结果的准确性。若产品为冻干粉形式，可参照以下方式操作。
离心操作：高速（10000-12000 rpm），离心30s；或者低速（3000-3500 rpm），离心5 min。
a.确认溶解缓冲液：推荐使用说明书中的缓冲液进行溶解，我们会赠送：
注：不同细胞因子的复溶及稀释要求可能存在差异，具体步骤请务必参考所使用的细胞因子说明书，确保本套装中的复溶液和稀释液与细胞因子说明书中“复溶方法/Reconstitution”指定的复溶液和稀释液保持一致。
b.确认母液浓度：细胞因子在一定的浓度范围内可以保持良好的稳定性，说明书会标示推荐浓度范围，例如0.1-1 mg/mL。
c.确认溶解环境：超净工作台内进行，全程无菌操作。
d.复溶方式：参考所使用的细胞因子说明书，加入适量细胞因子复溶液采用轻柔吹打或低速振荡的方式使其充分溶解，配制成高浓度母液，推荐浓度为0.1~1.0mg/mL。有的细胞因子溶解比较慢，需要在室温静置或者摇床低速摇一段时间使充分溶解。
溶解后的细胞因子溶液可以在2-8度储存1周。
如要长期保存，则需用含载体蛋白（如0.1% BSA，或5% HSA）的溶液进一步稀释，然后分装冻存于-20℃至-80℃可保存3～6个月。建议您根据单次实验需求进行分装（建议分装量为单次使用量的1.1~1.2倍），且分装体积不少于20 μL/管。
向培养基添加细胞因子前，如需进一步降低细胞因子浓度，建议使用细胞因子稀释液
进行梯度稀释。不建议直接稀释超过500倍，以减小移液误差并确保体系混合均匀。
准确计算：提前计算好每一步的稀释倍数和体积。使用高精度移液器。
更换枪头：每一步稀释都必须更换新枪头，建议使用低蛋白吸附离心管及低蛋白吸附枪头（83036ES），以减少因非特异性吸附造成的蛋白损失。
充分混匀：每步稀释后，用移液器轻轻吹打混匀（避免产生气泡）或轻微涡旋（若体积较大）。
反向稀释法：对于极高倍数的稀释（如从母液稀释到pg/mL级别的工作液），建议采用“反向稀释”或“中间浓度”法，即先稀释到一个中间浓度，再用中间浓度稀释到工作浓度，以减少误差。
注：低浓度工作液建议现配现用。如需暂存低浓度工作液，可置于2–8℃条件下保存，存放时长不得超过24小时。（细胞因子活性可能在保存过程中下降10-20%）
细胞因子是蛋白质，反复冻融会导致蛋白质构象改变、活性丧失，同时冰晶会破坏蛋白结构，降低其生物学效能。
根据单次实验用量，将复溶后的母液分装到多个无菌的、低蛋白吸附的PCR管或离心管中。例如，每管分装10 μL或20 μL。
细胞因子的作用存在剂量依赖性，过高或过低浓度均可能达不到理想效果，甚至产生副作用（如高浓度IL-2可能诱导细胞凋亡）。确定最佳浓度的方法如下：
查阅文献：参考同类细胞模型的已发表数据，初步确定细胞因子作用浓度范围。
梯度浓度实验：设置5~10个浓度梯度（如0.1、1、10、50、100 ng/mL），作用于靶细胞后，通过检测细胞增殖（CCK-8法）、凋亡（流式细胞术）、相关基因表达（qPCR）等指标，筛选出效应最显著且无明显细胞毒性的浓度。
考虑作用时间：细胞因子的作用效果与孵育时间相关（如短期作用诱导活化，长期作用可能导致耐受），需同步优化时间参数。
产品失活
储存不当（反复冻融）。
复溶时使用了错误的缓冲液或剧烈操作。
工作液配制后放置过久。
浓度配制错误
复溶体积计算或移液错误。
稀释步骤出错（未换枪头）。
工作浓度选择不当（过高产生抑制，过低无效果）。
细胞状态不佳
细胞不健康、密度过低、处于静息期，无法响应。
细胞缺乏相应受体
确认你的靶细胞表达该细胞因子的特异性受体。
实验系统问题
培养基中含血清（血清中含多种细胞因子和抑制剂）、含有酚红等，可能产生干扰。
检测方法不灵敏
选择的检测指标（如增殖、磷酸化、基因表达）是否合适？检测窗口期是否正确？
空白对照：只加完全培养基的细胞。
溶剂对照：加入与细胞因子工作液等体积的、含相同浓度载体蛋白的稀释液。
已知有功能的细胞因子/刺激剂：使用在相同细胞上已验证有效的试剂，证明你的细胞和检测系统是正常的。
商品化阳性刺激试剂盒：如用于免疫细胞刺激的PMA/lonomycin混合物。
很多细胞因子在高浓度下具有抑制生长或促凋亡作用（如TNF-α, TGF-β），这是一种正常现象。解决方法：通过剂量反应曲线找到既能产生效应又无明显毒性的浓度窗口。缩短刺激时间，或在刺激后更换新鲜培养基。
细胞因子是否有活性，由表达的序列是否包含活性区间所决定。所有细胞因子产品我们会进行活性测试，检测数据详情见CoA文件。
翌圣生物依托多年研发生产经验与技术积累，开发了一系列“三高一低”的HiActi®细胞因子，经过严格的质量控制及细胞功能的验证，确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平，助您拿到理想的实验结果。
HiActi®细胞因子选购指南
|
类别 |
解决方案 |
|
类别 |
解决方案 |
|
培养用细胞因子 |
|
|
类器官培养案例 |
|
类别 |
解决方案 |
|
多能干细胞 胚胎干细胞 诱导多能干细胞 |
|
|
专能干细胞 神经干细胞 造血干细胞 间充质干细胞 |
IL-3/SCF/FLT3L：赋能HSPC体外高效扩增的核心驱动体系 |
|
培养用细胞因子 |
|
类别 |
解决方案 |
|
先天性免疫细胞 吞噬细胞 树突状细胞 自然杀伤细胞 嗜酸/碱性粒细胞 |
小鼠骨髓来源的树突状细胞（BMDC）培养方法及细胞因子的选择 |
|
适应性免疫细胞 T细胞 B细胞 |
翌圣生物HiActi®高活性细胞因子详细货号选购信息，请点击查看专题：翌圣生物HiActi®细胞因子系列产品-选购指南
